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如何选择流式细胞仪测定常用的荧光染料流式细胞仪测定常用的荧光染料有很多种我们如何来选择流式细胞仪测定的常用荧光染料呢?
首先要考虑,他们分子结构不同激发光谱和发射光谱也不同选择荧光染料时,必须依据流式细胞仪所配备的激光光源的发射光波长做为重点考虑。发射光波长,如:氩离子气体激光管它的发射光波488
m;
氦氖离子气体激光管发射光波长633
m;488
m激光光源常用的荧光染料有FITC(异硫氰酸荧光素);PE(藻红蛋白)
PI(碘化丙啶)CY5(化青素)preCP叶绿素蛋白
ECD藻红蛋白得克萨斯红等。激发光和发射光波长,如下:
FITCPEPIECDCY5PreCP
激发光波长(
m)488488488488488488
发射光峰值(
m)525(绿)575(橙红)630(橙红)610(红)675(深红)675(深红)
f流式细胞仪中常用的荧光染料光学特征以及需要的激光器

称Ex波长
mEm波长
m

注激光器
Hoechst33342355
465
DNA染色
Hoechst33258365
465
核酸标记
DAPI
372
456
351
m紫外激光器
I
do1
350
405
细胞内钙离子标记
FITC
490
520
R_PE
480
578
PE_CY5
480
670
PE_CY55
480
695
标记抗体
488
m
PerCP
490
675

AlexaFluor488494
517

PE_TexasRed480
613

Rhodami
e123500
540
线粒体标记

Fluo3
506
526
细胞内钙离子标记光
DiOC63
480
501
内质网标记

YOYO1
490
510
DNA染色
PropidiumIodide530
615
核酸标记
Acridi
eOra
ge490
640
APC
650
660
AlexaFluor647650
668
标记抗体
CY5
650
667
633
m氦氖激光器
f流式细胞仪交流论坛:httpbbsbbioocomforum1811ht
ml
荧光染料谱
染料名称
Excitatio
mEmissio
m
Reactivea
dco
jugatedprobes
Hydroxycoumari

325
386
分子量备注信息
33
1
Succi
imidylester
Ami
ocoumari

350
33
4450
Succi
imidylester
fMethoxycoumari

360
31
4107
Succi
imidylester
CascadeBlue
59
375401
423
6
Hydrazide
PacificBlue
40
403
4556
Maleimide
PacificOra
ge
403
551
Luciferyellow
425
528
NBD
29
466
5394
NBDX
RPhycoerythri
PE
480565
24578
0k
4805656
PECy5co
jugates50
670
4805657
PECy7co
jugates43
767
akaCychromeR670TriColorQua
tumRed
Red613PerCPTruRedFluorX
480565490490675494
613
PETexasRed
675
Peridi
i
chlorphyllprotei

695
PerCPCy55co
jugate
58
5207
GEHealthcare
Fluorescei

38
495
5199
FITCpHse
sitive
BODIPYFLTRITC
503
512
44
547
5724
TRITC
XRhodami
e
54
570
5768
XRITC
Lissami
eRhodami
eB
TexasRed
570
590
589
615
62Sulfo
ylchloride
fAllophycocya
i

650
APC
APCCy7co
jugates
650755
AlexaFluor系列荧光染料
AlexaFluor350
343
AlexaFluor405
401
AlexaFluor430
434
AlexaFluor488
499
AlexaFluor500
503
AlexaFluor514r
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