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石蜡切片制作方法的改良
作者：毛晓霞来源：《安徽农学通报》2013年第08期
摘要：创立了一种时间短、质量高的石蜡切片制作方法。针对动植物材料结构特点不同，在脱水、透明、透蜡、包埋、染色和封固等环节进行了一系列改良，获得了染色清晰、组织结构完整的切片。该文以小蜡树为例，详细介绍了改良后的石蜡切片制作方法。实验结果表明，相比传统制作方法，改良后的制作方法减少了切片制作时间，缩短了实验周期。同时，有效地提高了批量制备石蜡切片标本的整体质量，有利于实验教学和组织学、病理学等领域的研究工作。
关键词：组织学；石蜡切片；制作方法：改良
中图分类号Q34文献标识码A文章编号10077731（2013）081502
石蜡切片制作技术近年来广泛应用于组织学、细胞生物学、法医学和病理学等领域。细胞和组织多为无色透明，离开机体后会很快发生溶解和腐败，细胞原始形态和结构难以保存1。通过石蜡切片制作技术，经过脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色及封固等步骤，可以清晰辨认其形态结构，增加样品不同细胞成分之间的对比度。但缺点是石蜡切片制作过程复杂，制作周期长，组织块易破碎，切片皱褶多等2。笔者通过长期的摸索，改进了常规石蜡切片制作方法，缩短了时间，并将重点步骤加以改良，以利于短时间制作出高质量的切片。本文以小蜡树为例，将改良后的石蜡切片制作方法介绍如下。
1材料与方法
11材料小蜡树叶片采自安庆师范学院植物园。试验仪器：石蜡切片机LeicaRM2235、恒温培养箱、水浴锅、光学显微镜。试验试剂：无水乙醇、95乙醇、丙酮、二甲苯、石蜡为上海标本模型厂生产，熔点56～58℃，中性树胶为上海生工产品，其余试剂均为国产分析纯。
12方法
121取材与固定摘取幼嫩的小蜡树叶片，拿双面刀片，过叶片主脉做横切面，切成1cm×1cm大小，取材后立即投入car
oy固定液中固定。4℃保存，固定7d，可以延长固定时间，但最长不超过两周3。取材要准确、迅速和新鲜，防止细胞组织发生自溶现象4。固定液的体积应为材料总体积的10～15倍。除了car
oy固定液外，根据实验材料性质不同，选取不同的固定液。例如动物使用20福尔马林，原位杂交使用4的多聚甲醛，也可将多种固定液混合使用。
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122脱水与透明将固定后的材料用镊子夹出，投入不同浓度梯度的乙醇中脱水，乙醇要放在有盖容器中5。依次为：50乙醇、6h75乙醇、6h85乙醇、3h95乙醇、1h，95乙醇、05h无水乙醇r