板的技术和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术。2、学习并掌握过氧化氢酶测定、细胞色素氧化酶测定和糖发酵与氧化试验的实验原理及其操作方法。3、复习显微镜底倍镜和高倍镜的使用技术，复习油浸系物镜的基本原理，复习其使用方法。4、明确培养基的配制原理。复习配制培养基的一般方法和步骤。复习消毒和灭菌的原理，复习各种灭菌方法的操作步骤。5、复习、掌握细菌稀释分离、划线分离等技术。复习并掌握平板倾注法和斜面接种技术，了解培养细菌的培养条件和培养时间。复习平板菌落计数法。6、复习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的简单染色法。复习鞭毛染色、革兰氏染色的基本原理和操作方法。实验过程：实验器材：培养基：牛肉膏蛋白胨培养基试剂：革兰氏染色液、5孔雀绿水溶液、05番红、甘油、灭菌水仪器或其他：三角瓶、试管、接种环、接种针、载玻片、酒精灯、涂布棒、移液枪、显微镜、平皿、木夹子等。样品：生命科学院试验田中土壤实验步骤：分离与纯化准备将内装90ml的蒸馏水和玻璃珠若干的三角瓶、已配好的培养基、涂布棒、试管（内装9ml蒸馏水）若干、平皿若干放入高压锅高温灭菌。稀释将土壤样品10g加入90ml灭菌水中振荡20分钟，形成土壤悬浊液，取1ml加入装有9ml
f灭菌水试管中振荡形成102稀释，依次将土壤样品稀释103、104、105、106、107涂布平板将105、106、107的稀释样品分别涂布到已制好的固体培养基平板上，每种涂3个平板。培养将平板置于37。C恒温培养三天。分离从平板中挑取单个菌落进行平板划线分离培养，培养2天，共选了4种菌。纯化将划线长出的菌接种于已准备好的固体斜面培养基中。培养2天。镜检对平板中的4种菌分别进行美蓝染色、革兰氏染色、芽孢染色，放在显微镜下观察，并记录结果。保种将长出菌的斜面放入冰箱中保存。生理生化实验糖类发酵与氧化实验器具或材料试管、接种针、恒温箱等糖类发酵与氧化实验培养基（半固体）操作步骤接种：以移接1824小时待鉴定的菌用接种针穿刺接种。接4支，其中2支用灭菌的凡士林或石蜡洋菜上封盖，以隔绝空气为闭管，另2支不封为开管，同时要有不接种的闭管作对照。培养：置于37度恒温箱中，培养816个小时，1天、3天和7天观察：在上述培养时间内观察试管中指示剂的变化情况结果在8小时、16小时检查，若培养基柱上部变黄，下部仍为绿色，则证明为氧化型，全部变黄或下部变黄上部为绿，则为发酵型。过氧化酶测定器具与材r