高效液相色谱法测水溶性维生素综述
王海霞（扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009）摘要：高效液相色谱是一种具有高灵敏度、高选择性的高效快速分离分析技术。本文综述了用高效液相色谱法测定水溶性维生素含量的方法，列举了烟酸和维生素C的测定过程，对仪器的保养也作了部分介绍。关键词：高效液相色谱水溶性维生素烟酸维生素C高效液相色谱HighPerforma
ceLiquidChromatographyHPLC是近30年发展起来的一种具有高灵敏度、高选择性的高效快速分离分析技术。它既能用于微量组分的分析测定，又能用于大量的制备分离，灵活多样，其应用范围已超过其他各种分离方法，尤其在生化医药样品的分析分离方面更充分发挥它的特长，为推动该领域的进步和发展作出了巨大贡献1。高效液相色谱系统是由储液器、泵、进样器、分离柱、检测器、数据处理系统等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入进样系统或进样器。样品通过进样器以精确的体积插入流动相中再被流动相带到柱内分离过程在柱内进行被分离成单个组分的样品依次从柱内流出通过检测器样品浓度被转变成电信号送到记录器和数据系统经系统处理数据以图谱和图表形式打印出来2，3。对HPLC技术及设备原理了解了这样就能够提高仪器的利用率更好地发挥仪器作用4，5，6。维生素为维持生物体正常机能的必需物质常作为营养强化食品的添加因子它广泛存在于谷类、果蔬、肉禽及蛋类等加工品中因此维生素的检测对食品7，8，9、饮料10，11、制药12、饲料13等领域都有非常重要的意义。水溶性维生素与人体的生长发育及健康密切相关。水溶性维生素中又以维生素C及B族维生素较为重要14。水溶性维生素的测定方法主要包括分光光度法、分子荧光法、微生物法和高效液相色谱法等。分光光度法的样品前处理一般较复杂，且干扰物质多，测定结果偏高；分子荧光法的样品预处理也很复杂，在对多维片和维生素强化食品进行多种维生素的检测时；会给定量带来一定的困难；而用高效液相色谱法测定水溶性维生素，样品前处理简单样品用量少，分离速度快，可一次性分析多种水溶性维生素。目前国内用高效液相色谱法分析水溶性维生素时，一般使用Water公司专制的PICB离子对试剂，其价格昂贵且不易保存15。目前，多种水溶性维生素的色谱分离条件有离子对HPLC、胶束HPLC和非离子对HPLC16，17，18，前者因离子对试剂价格昂贵，且对色谱柱柱效及泵损害大，不适合作为常规分析方法19。HPLC应用于水溶性维生素的分r