断肿瘤患者的预后及免疫治疗效果；观察药物、肿瘤抗原以及其他抗原对CTL杀伤功能的影响；鉴定淋巴细胞的功能性亚群等。4．吞噬细胞功能测定从趋化、吞噬和杀菌三个方面进行检测。常用的方法：趋化功能测定的有滤膜渗透法、琼脂平板法，吞噬功能测定的有吞噬试验，杀菌功能测定的有NBT还原试验、杀菌功能试验、化学发光试验等方法。五论述题2．Ficollhypaque分离液分离PBMC的原理：血液单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞。人外周血单个核细胞的密度为1050～1077，而粒细胞和红细胞的密度在1090～1093。利用密度为1077±0001的Ficollhypaque分层液，将待分离的细胞悬液小心铺于其上，经离心后单个核细胞悬浮于分层液上层界面，而红细胞与粒细胞沉于管底，据此可将血液中的单个核细胞与其他细胞分离开。Ficollhypaque：分离液分离PBMC的步骤：1取静脉血，加肝素溶液抗凝，再加入等量Ha
ks液，混匀。2取分层液置于离心管中，将稀释血液沿管壁缓缓叠加于分层液上，形成清晰界面。稀释血液与分层液的容积比例以213l为宜。3置水平离心机中离心2000r／mi
20mi
。4离心后从离心管底部到液面分为五层，依次为红细胞沉淀层、粒细胞层、分层液层、白雾状单个核细胞层、血浆层含血小板和破碎细胞。5用滴管直接吸出单个核细胞层，置于另一离心管中。6加入5倍量以上的Ha
ks液，充分混匀，离心1000r／mi
10mi
。离心后倾弃上清液，再用Ha
ks液洗涤2次。7用含10％～20％，灭活小牛血清的Ha
ks液或培养液配制细胞悬液。计数，并分别计数粒细胞和单个核细胞数，同时用台盼蓝染色检测细胞活力，最后按实验要求将细胞悬液调整到适当浓度。注意事项：1将血液适当稀释，减低血液黏稠度有利于提高单个核细胞的收获率。2温度变化可直接影响分层液的密度，即影响细胞的收获率和纯度。故应在室温18～25℃下进行实验，分层液使用前应预温至室温。3分层液应直接加入管底，防止浸沾四周管壁。4将细胞悬液叠加于分层液上时务必小心，不要扰乱界面以影响分离效果。5分离时的转速与时间应根据不同标本作相应调整。离心后若见白雾状细胞层中仍掺杂红细胞，应提高转速或延长离心时间；若淋巴细胞丢失过多，则应适当降低转速或缩短离心时间。
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