猪流行性腹泻病毒IgG抗体间接ELISA检
测方法的建立
作者：芮聪杰潘孝成沈学怀来源：《安徽农业科学》2020年第19期
f摘要为建立检测猪血清中猪流行性腹泻病毒（PEDV）IgG抗体的间接ELISA方法，以PEDV重组N蛋白和纯化全病毒为包被抗原，采用方阵滴定法优化反应条件，建立了2种检测猪血清中PEDVIgG抗体的间接ELISA方法。结果显示，纯化全病毒和重组N蛋白抗原的最
f佳包被浓度分别为100和492μgmL，检测样品最佳稀释度分别为1∶100和1∶50，重复性试验的变异系数均小于10，PEDV阳性血清的最低检测稀释倍数分别为1∶1600和1∶800，对猪传染性胃肠炎病毒、猪伪狂犬病毒等阳性血清均无交叉反应性，2种方法对临床样品检测符合率为9592。这表明2种方法均具有良好的敏感性、特异性和重复性，可用于检测和评价血清中特异性PEDVIgG抗体。
关键词猪流行性腹泻病毒IgG抗体间接ELISA
中图分类号S852651文献标识码A文章编号05176611（2020）19010303
doi：103969jiss
05176611202019026
AbstractI
ordertoestablishi
directe
zymeli
kedimmu
osorbe
tassy（iELISA）fordetecti
gspecificIgGa
tibodylevelagai
stporci
eepidemicdiarrheavirus（PEDV）i
pig’sserum，thetwoi
directELISAmethodswereestablishedwiththepurifiedPEDVa
drecombi
a
tNprotei
ofPEDVascoati
ga
tige
Theresultsshowedthattheoptimalcoati
ga
tige
co
ce
tratio
swere100a
d492μgmLrespectively，a
dtheoptimaldilutio
sofsamplewere1∶100a
d1∶50respectivelyThecoefficie
tsofvariatio
ofthei
traa
di
terbatchrepetitivetestswerealllesstha
10，themi
imumdilutio
ratioofPEDVpositivesamplewere1∶1600a
d1∶800respectivelyThetwoi
directELISAmethodshad
ocrossreactio
withthosepositiveseraoftra
smissiblegastroe
teritisvirus，porci
epseudorabiesvirus，a
dsoo
Thecoi
cide
cerateofthetwoi
directELISAmethodswas9592Theresultssuggestedthatthetwoi
directELISAmethodswerespecific，se
sitive，a
drepeatableTheycouldbeusedtodetecta
devaluatetheIgGa
tibodyagai
stPEDVi
pig’sserum
KeywordsPorci
eepidemicdiarrheavirusIgGa
tibodyI
directELISA
基金目安徽省科技重点研发项目（1704a07020066）安徽省农业科学院平台项目（2020YL094）安徽省生猪产业技术体系项目（AHCYTX0509）安徽省科技重大专项（17030701008）。
作者简介芮聪杰（1989），男，河南漯河人，硕士，从事畜禽传染病研究。通信作者，副研究员，博士，从事畜禽传染病研究。
收稿日期20200310
猪流行性腹泻（porci
eepidemicdiarrhea，PED）是由猪流行性腹泻病毒（porci
eepidemicdiarrheavirus，PEDV）引起的一种以水样腹泻、脱水、呕吐r