大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相，称为经典液相色谱法，此方法柱效低、时间长（常有几个小时）。高效液相色谱法Highperforma
ceLiquidChromatography，HPLC是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱法HighPressureLiquidChromatography，HPLC。又因分析速度快而称为高速液相色谱法HighSpeedLiquidChromatography，HSLP。也称现代液相色谱。
二、HPLC的特点和优点
HPLC有以下特点：
高压压力可达150300Kgcm2。色谱柱每米降压为75Kgcm2以上。
高速流速为01100mlmi
。
高效可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。
高灵敏度紫外检测器灵敏度可达001
g。同时消耗样品少。
HPLC与经典液相色谱相比有以下优点：
速度快通常分析一个样品在1530mi
，有些样品甚至在5mi
内即可完成。
分辨率高可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。
灵敏度高紫外检测器可达001
g，荧光和电化学检测器可达01pg。
柱子可反复使用用一根色谱柱可分离不同的化合物。
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f样品量少，容易回收样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。
三、色谱法分类
按两相的物理状态可分为：气相色谱法GC和液相色谱法LC。气相色谱法适用于分离挥发性化合物。GC根据固定相不同又可分为气固色谱法GSC和气液色谱法GLC，其中以GLC应用最广。液相色谱法适用于分离低挥发性或非挥发性、热稳定性差的物质。LC同样可分为液固色谱法LSC和液液色谱法LLC。此外还有超临界流体色谱法SFC，它以超临界流体（界于气体和液体之间的一种物相）为流动相（常用CO2），因其扩散系数大，能很快达到平衡，故分析时间短，特别适用于手性化合物的拆分。
按原理分为吸附色谱法AC、分配色谱法DC、离子交换色谱法IEC、排阻色谱法EC，又称分子筛、凝胶过滤GFC、凝胶渗透色谱法GPC）和亲和色谱法。（此外还有电泳。）
按操作形式可分为纸色谱法PC、薄层色谱法TLC、柱色谱法。
四、色谱分离原理
高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法（正相与反相）、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。
1．液固色谱法使用固体吸附剂，被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。分离过程是一个吸附－解吸附的平衡过程。常用的吸附剂r