SDSPAGE电泳操作步骤：
试剂配制：
（实验中采用均为分析纯）
（1）丙烯酰胺贮液
（4℃下棕色瓶中储存，试剂尽量勿存储过久）
丙烯酰胺贮液（T30，C3）称取291g丙烯酰胺和09g甲叉双丙烯酰胺，用双蒸水溶解，定容至100ml，过滤备用。试剂有毒，操作中注意防护（2）浓缩胶缓冲液（1molLTrisHCl，pH68）（4℃下棕色瓶中储存，试剂尽量勿存储过久）606gTris溶解于35ml双蒸水中，用浓盐酸调节pH至68，再用双蒸水定容至50ml。（3）分离胶缓冲液（15molLTrisHCl，pH88）（4℃下棕色瓶中储存，试剂尽量勿存储过久）1816gTris溶解于75ml双蒸水中，用浓盐酸调节pH至88，再用双蒸水定容至100ml。（4）10SDS（5）10过硫酸铵（APS）：使用前新鲜配制，低浓度APS一般当天用当天配制，勿过夜使用。催化作用）（6）尿素（7）TEMEDN，N，N’，N’四甲基乙二胺（8）电极缓冲液1×（棕色瓶中4℃储存，一般使用34次）0025molLTris，0192molL甘氨酸，01SDS，pH83（9）电极缓冲液2×（棕色瓶中4℃储存，一般使用34次）0050molLTris，0384molL甘氨酸，01SDS，pH83（10）样品缓冲液（pH68）（4℃下棕色瓶中储存，试剂尽量勿存储过久）16ml浓缩胶缓冲液（pH68）4ml10SDS06g二硫苏糖醇DTT25ml87甘油01mg溴酚蓝，用双蒸水稀释到20ml（11）考玛斯亮蓝R250染色方法：
fa．固定液20三氯乙酸b．脱色液250ml乙醇，80ml冰醋酸，加水稀释至1000ml。c．染色液称取029g考玛斯亮蓝R250溶于250ml上述脱色液中
样品处理：
处理完样品应尽快使用，若存储，须于20℃下。
1CytC酶解样○每管分别加入8l细胞色素C（20mgml），10ul50mMTrisHCl（pH80）1l胰蛋白酶（细胞色素C：胰蛋白酶50：1）。37℃水浴，2h。立即放入20℃冰箱冷冻保存备用。上样前加15μ上样BUFFER，75℃水浴510mi
2大肠杆菌蛋白○取10μ工程菌种接入10
mlLB液体培养基里，过夜培养12h，取出1ml菌液离心10000gr，5mi
。弃上清，用1mlTrisHcl（pH8050mM）洗涤12次，后分别加入20μ（pH805mM）、10μEDTA，20℃保存。上样前加入2μ5X，再加入50μ上样BUFFER，75℃水浴510mi
3CytC○15μCytC加入15μ上样BUFFER，75℃水浴510mi
4低分子量肽标准○取810μMaker（2mgml）加入10μ上样buffer，再加入5μddH2O，75℃水浴510mi
5SPI多肽的制备○Ⅰ材料及试剂（试剂均为分析纯）纯大豆粉木瓜蛋白酶（sigmaP32505002000AUg）
f正己烷巯基乙醇TrisHCl缓冲液（003M、pH80）02MHCl叠氮钠考马r