实验一微生物培养基的配制和灭菌
培养基是将微生物生长繁殖所需要的各种营养物质，用人工方法配制而成的各种营养基质。它具有微生物正常生活所需的各种养料和适宜的环境条件：1适当组分和比例的营养物质；2适宜的pH值；3合适的渗透压；4保持无菌状态。所以培养基是培养微生物所必需的最主要材料。培养基的配制是微生物工作者的主要技术操作之一。
一、实验目的与耍求：
1．了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。2．了解几种灭菌方法，掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。3．熟悉分离、培养微生物前的有关准备工作及操作方法。
二、实验原理与材料：
一培养基的种类根据培养基的组成成分，可将培养基分为三类：合成培养基：由各种纯化学物质按一定比例配制而成。半合成培养基：由一部分纯化学物质和另一部分天然物质配制而成。天然培养基：利用天然来源的有机物配制而成的。从培养基的物理状态来分：液体培养基：不加凝固剂。固体培养基：在液体培养基中加2％左右的凝固剂。半固体培养基：在液体培养基中加入02％一05％凝固剂。微生物最常用的凝固剂为琼脂其次为明胶，又叫洋菜、冻粉。它不是一种营养物质，只能被极少数种类的细菌分解利用。琼脂是从海藻中主要是石花菜提取而制成的。是一种多糖类化合物，主要成分是复杂的多糖硫酸酯钙盐，琼脂是一种可逆性胶体，在常规浓度下加热到96℃以上即成溶胶状态，融化的琼脂，当温度下降到42℃以下，又凝固为固体。
比较项目
表31
琼脂与明胶特性比较
琼脂
明胶
比较项目
琼脂
明胶
熔点℃凝固点℃酸碱度灰分％氧化钙％氯化镁％氮％
9640微酸160115O77O40
2520酸性1401500000183
微生物可利用性
耐热性来源化学本质常用浓度（％
绝大多数微生物不能水
解利用强植物多糖
152
部分微生物能水解利用
弱动物蛋白质5一12
（二）实验材料1．药品：牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂；马铃薯，蔗糖；可溶性淀粉、K2HPO4、KN03，MgS047H20、FeSO47H20、等。2．高压蒸汽灭菌器、恒温干热灭菌箱、细菌过滤器、紫外线杀菌。3．其它：天平、牛角匙、电炉、1NHCl、1NNaOH、pH试纸、刻度搪瓷杯、量筒、漏斗、漏斗架、玻棒、带玻璃珠的三角瓶、带棉塞的无菌试管、无棉塞的空试管、培养皿、吸管、各种包装纸、防水纸、绳索、棉花、标签等。
f三、实验方法与步骤：
一、培养基的配置1．培养基的配制常用方法和步骤：1称量：按照培养基配方，正确称取r