光经过单色器分光后即可获得任一所需波长的平行单色光该单色光通过样品池静样品溶液吸收后，通过光照到光电管或光电倍增管等检测器上产生光电流，产生的光电流由信号显示器直接读出吸光度A。可见光区采用钨灯光源、玻璃吸收池紫外光区采用氘灯光源、石英吸收池。
本实验采用紫外分光光度法测定蛋白质含量。蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，因此，蛋白质具有吸收紫外光的性质，其最大吸收峰位于280
m附近（不同的蛋白质吸收波长略有差别）。在最大吸收波长处，吸光度与蛋白质溶液的浓度的关系服从朗伯比耳定律。该测定法具有简单灵敏快速高选择性，且稳定性好，干扰易消除不消耗样品，低浓度的盐类不干扰测定等优点。
特点：带光谱分子光谱
应用：定性分析最大吸收波长定量分析朗伯比尔定律（标准曲线法和标准加入法）
根据朗伯－比耳定律：Aεbc，只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。
三、仪器与试剂
仪器：TU1901紫外可见分光光度计，比色管，移液管试剂标准蛋白质溶液：300mgmL1溶液
09NaCl溶液，待测蛋白质溶液
f四、实验步骤
〈一〉准备工作1启动计算机，打开主机电源开关，启动工作站并初始化仪器。预热30mi
。2在工作界面上选择测量项目（光谱扫描，光度测量），本实验选择光度测量，设置测量条件（测量波长等）。3将空白放入测量池中，点击START扫描空白，点击ZERO校零。4标准曲线的制作。
〈二〉测量工作1吸收曲线的绘制用吸量管吸取3mL300mgmL标准蛋白质溶液于10mL比色管中，用09NaCl溶液稀释至刻度，摇匀。用1cm石英比色皿，以09NaCl溶液为参比，在190
m～400
m区间，测量吸光度。2标准曲线的制作：用吸量管分别吸取05、10、15、20、25mL300mgmL1标准蛋白质溶液于5只10mL比色管中，用09NaCl溶液稀释至刻度，摇匀。用1cm石英比色皿，以09NaCl溶液为参比，在280
m处分别测定各标准溶液的吸光度A278记录所得读数。取适量浓度的待测蛋白质溶液3mL，按上述方法测定278
m处的吸光度。平行测定三份。
五、数据处理：
1以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。
由吸收曲线可得最大吸收波长λmax278
m
f2以标准蛋白质溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
标准溶液浓度CmgmL030045060075090
吸光度A02230308039704900558
浓度C吸光度A标准曲线方程是：A0568r