或48小时）。12后24h4、想每孔加入10μLCCK溶液（注意不要再孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。5、将培养板在培养箱内孵育14小时。（2h后）6、用酶标仪测定在450
m处的吸光度。7、如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μL01M的HCL溶液或者1wvSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。注意：如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。备注：①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。（怎么判断哪个时间好？）②有条件的情况下建议采用多通道移液器，可以减少平行孔减的差异。加入CCK试剂时，建议斜贴着培养板壁加，不要插到培养基页面下加，容易产生气泡，会干扰OD值读数。③白细胞可能需要培养较长时间。④当使用标准96孔板时，贴壁细胞的最小接种量至少为1000个孔100μL培养基。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2500个孔100μL培养基。如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10加入CCK溶液。⑤如果没有450
m的滤光片，可以使用吸光度在430490
m之间的滤光片，但是450
m滤光片的检测灵敏度最高。⑥培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。
f活力计算：
细胞活力（％）A加药A（空白）A（0加药）A（空白）×100
A（加药）：具有细胞、CCK溶液和药物溶液的孔的吸光度
A（空白）：具有培养基和CCK溶液而没有细胞的孔的吸光度
A（0加药）：具有细胞、CCK溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力
保存条件：
4℃干燥避光保存，有效期一年。
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