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岛津高效液相色谱仪LC20A操作规程
一、目的:为了安全、规范、正确使用岛津LC20A型高效液相色谱仪,特制订本操作规程。二、范围:仅适用于岛津LC20A型高效液相色谱仪。三、环境要求:温度4~35℃,相对湿度为40~80,最好是恒温、恒湿,远离高电干扰、高振动设备。四、LC20A高效液相色谱仪工作原理:
高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统样品溶液经进样器进入流动相被流动相载入色谱柱固定相内由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数在两相中作相对运动时经过反复多次的吸附解吸的分配过程各组分在移动速度上产生较大的差别被分离成单个组分依次从柱内流出通过检测器时样品浓度被转换成电信号传送到工作软件数据以图谱形式表现出来。
开机顺序:A泵→B泵→柱温箱→自动进样器→检测器→系统控制器后→电脑显示器→主机(注:仪器各单元的开关均在左下角)五、样品准备:51开机之前,准备好所用的流动相和样品,检查储液器的吸滤头是否在液面以下。流动相和样品必须通过045um过滤器过滤。52流动相:必须使用HPLC级或相当于该级别的流动相,并通过045um过滤器过滤。过滤后的流动相必须经过充分脱气,以除去其中溶解的气体O2等,如不脱气易产生气泡、基线噪声增加、灵敏度下降,甚至无法分析。53查看仪器使用记录,了解仪器当前状况。54样品前处理:样品也要尽可能清洁,可选用样品过滤器或样品预处理柱(SPE)对样品进行预处理。
图4样品前处理
f六、操作规范流程:
61启动:双击
LCsolutio
,“LCsolutio
Lau
cher”启动:此时仪器发出“嘀嘀”两声,表明系统与仪器连接成功
62设置系统配置:单击
,选择自动配置,检查系统与仪器的实际配置是否相符。
图7:系统配置63设定方法:仪器参数视图“高级”处,分别设定数据采集、LC时间程序、泵、荧光检测器、柱温箱、自动进样器、自动排气等参数,保存方法(另存为)。单击下载,将设置传输到仪器。如图8:
图8:仪器参数视图
64排气:点击
“自动排气”,出现图9界面。打开排液阀(逆时针旋转15°),开始排空,检查流动相
入口管路中没有气泡后。
f图9:系统排气显示
图10:仪器排气操作示意图
65运行变化:关闭排液阀(顺时针旋紧),点击“仪器开关”“就绪”,观察基线和压力变化,待基线和压力平稳,准备进样。
,听到“嘀”声,系统开始运行并显示
图11:观察基线与电压变r
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