分光光度法
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基本原理仪器结构显色与测量条件的选择723N型分光光度计操作维护第一节基本原理在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法主要有红外吸收光谱：分子振动光谱，吸收光波长范围251000m主要用于有机化合物结构鉴定。紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围200400
m（近紫外区），可用于结构鉴定和定量分析。可见吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围400750
m，主要用于有色物质的定量分析。光的吸收定律1朗伯比耳定律布格Bouguer和朗伯Lambert先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度成正比：A∝b1852年比耳Beer又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有成正比的关系：A∝c二者的结合称为朗伯比耳定律：当一束平行的单色光通过均匀、非散射的稀溶液时，溶液对光的吸收程度与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。
朗伯比耳定律朗伯比耳定律是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。应用于各种光度法的吸收测量。它不仅适用于可见光，也适用于紫外光和红外光；不仅适用于均匀非散射的液体，也适用于固体和气体。朗伯比耳定律，数学表达式其数学表达式为式中A：吸光度；描述溶液对光的吸收程度b：液层厚度光程长度，通常以cm为单位；c：溶液的摩尔浓度，单位molL；ε：摩尔吸光系数，单位Lmolcm；摩尔吸光系数ε的讨论

摩尔吸光系数ε在数值上等于浓度为1molL、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度；摩尔吸光系数ε的讨论（1）摩尔吸光系数是吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数；（2）不随浓度c和光程长度b的改变而改变。在温度和波长等条件一定时，ε仅与吸收物质
f本身的性质有关，与待测物浓度无关；（3）可作为定性鉴定的参数；（4）同一吸收物质在不同波长下的ε值是不同的。在最大吸收波长λmax处的摩尔吸光系数，常以εmax表示。εmax表明了该吸收物质最大限度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。摩尔吸光系数ε的讨论（5）εmax越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。ε105：超高灵敏；4ε6～10）×10：高灵敏；ε2×104：不灵敏。摩尔吸收系数和桑德尔灵敏度桑德尔灵敏度指数：S（μgcm2）在λmax时，A0001下，单位截面积光程内所能检测出来的吸光物质的最低含量。
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