一抗体之间构象相似时的结合力小于吻合时的结合力。免疫细胞化学技术一、免疫细胞化学技术的概述免疫细胞化学immu
ocytochemistryICC是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂荧光素、酶、金属离子、同位素显色来确定细胞内抗原的成分主要是多肽和蛋白质，对其进行定位、定性及定量的研究，称为～。
f一对抗原和抗体的要求具有特异性高和亲和力强的抗体是实验成功的首要条件。对抗体的要求：纯度高、比活性强；高度特异性抗体的获得，取决于抗原的纯度。对抗原的要求：纯度高，免疫原性强，稳定无变化。二抗原a
tige
Ag抗原的概念：凡是在机体内引起体液免疫和或细胞免疫反应的物质，称为抗原。抗原具有两个方面的特性：免疫原性：引起机体产生抗体和或致敏淋细胞的特性；免疫反应性：抗原能与相应的抗体及致敏淋巴细胞发生特异的结合或反应的特性。根据抗原是否显示免疫原性分为：完全抗原：分子量较大，一般在10kDa以上，并具有较复杂的化学组成。免疫原性最强的是蛋白质抗原，多糖次之；脂类和核酸必需和蛋白质及多糖形成复合物才具有良好的免疫原性。半抗原：又称为不完全抗原，分子量较小。例如：某些短肽、多糖、类脂和药物等。半抗原必需与载体结合，才能获得免疫原性。载体：通常是具有高度免疫原性的大分子物质，具有将免疫原性传递给耦联的半抗原能力。常用的载体有钥孔血蓝蛋白keyholelimpethemocya
i
，KLH、牛血清白蛋白bovi
eserumalbumi
BSA、卵白蛋白Ovalbumi
，OVA等。用戊二醛或碳化二亚胺作为交联剂通过功能基团NH2、COOH等将半抗原结合到载体上。结合比例为5kDa结合5～25个分子的小肽。（三）抗体a
tibodyAb1、抗体的概念：机体受到抗原刺激后，由浆细胞合成并分泌出一类具有与抗原发生特异性结合的球蛋白，被称为抗体。抗体主要存在于血清内；抗体都是免疫球蛋白，但免疫球蛋白并不一定都是抗体。免疫球蛋白根据重链的结构及抗原特异性不同分为五种，既IgG、IgD、IgE、IgA、IgM。2、免疫组化实验中常用的抗体：单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体：是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体，是应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备的。特异性强、抗体产量高。多克隆抗体：是将纯化后的抗原直接免疫动物后，从动物血中所获得的免疫血清，是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。特异性低，会产生抗体的交叉反应。多克隆抗体广泛应用于石蜡包埋组织切片，可减少假阴性染色r