人P16ELISA试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本
中人P16的含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人P16水平。用纯化的人P16抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入P16,再与HRP标记的P16抗体结合,形成抗体抗原酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的P16呈正相关。用酶标仪在450
m波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人P16浓度。试剂盒组成:
试剂盒组成
48孔配置
96孔配置
保存
说明书
1份
1份
封板膜
2片(48)
2片(96)
密封袋
1个
1个
酶标包被板
1×48
1×96
28℃保存
标准品:180
gL
05ml×1瓶
05ml×1瓶
28℃保存
标准品稀释液
15ml×1瓶
15ml×1瓶
28℃保存
酶标试剂
3ml×1瓶
6ml×1瓶
28℃保存
样品稀释液
3ml×1瓶
6ml×1瓶
28℃保存
显色剂A液
3ml×1瓶
6ml×1瓶
28℃保存
显色剂B液
3ml×1瓶
6ml×1瓶
28℃保存
终止液
3ml×1瓶
6ml×1瓶
28℃保存
浓缩洗涤液
(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶28℃保存
样本处理及要求:1血清:室温血液自然凝固1020分钟,离心20分钟左右(20003000转分)。仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合1020分钟后,离心
20分钟左右(20003000转分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(20003000转分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(20003000转分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7274)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(20003000转分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH74。用液氮迅速冷冻保存备
1
f用。标本融化后仍然保持28℃的温度。加入一定量的PBS(PH74),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(20003000转分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马r