选修一
专题5
1．红细胞含有大量的血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带氧气或二氧化碳，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题：1实验前取新鲜的血液，要切记在采血器中预先加入柠檬酸钠，取血回来马上进行离心，收集血红蛋白溶液。①加入柠檬酸钠的目的是________________________________________________________________________。②以上所述的过程即是样品处理，它包括________________________________________________________________________________________________________________________________________________、收集血红蛋白溶液。2收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析，这就是样品的粗分离。①透析的目的是________________________________________________________________________。②透析的原理是________________________________________________________________________。3然后通过________法将样品进一步纯化，最后经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。①样品纯化的目的是________________________________________________________________________。②血红蛋白有什么特点？________________________________________________________________________，这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析：蛋白质的提取和分离一般分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。样品处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放和分离血红蛋白溶液；通过透析对血红蛋白溶液进行粗分离，透析的原理是透析袋能使小分子自由进出而大分子则保留在袋内，从而除去分子量较小的杂质；然后通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，从而对样品进一步纯化，最后SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。
f答案：1①防止血液凝固②红细胞的洗涤、血红蛋白的释放2①去除分子质量较小的杂质内3凝胶色谱①通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去②血红蛋白呈现②透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋
红色在凝胶色谱分离时，可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液，这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作。2．凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离技术，由于设备简单、操作方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很高的分离效果，目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛应用，不r