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细胞、遗传物质相
对较少,最常用的原核细胞是
,其转化方法是:先用
处理细胞,使其成为感受
态细胞,再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态
细胞吸收DNA分子,完成
过程。
第四步:目的基因的检测和鉴定
1首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用

2其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA,方法是

3最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进


4有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如:转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。
(四)基因工程的应用
1植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。
2动物基因工程:提高动物生长速度;改善畜产品品质;用转基因动物生产药物:如生物反应器和
膀胱生物反应器,方法是将目的基因导入哺乳动物的
中,使其发育成转基因动物。
3基因治疗是把正常基因导入病人的体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗的目的,
这是治疗遗传病最有效的手段。
(五)蛋白质工程的概念:基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质,蛋白质工程师在基
因工程的基础上,延伸出来的第二代基因工程。
基本途径是:从预期的
出发→设计预期的
→推测应有的
序列→找到相对应的
序列。
专题2细胞工程
(一)植物细胞工程
1植物组织培养技术
(1)原理:
(2)过程:离体的植物器官、组织或细胞
常用的植物激素


植物体
2
f(3)用途:微型繁殖、作物脱毒(选材应该选择茎尖组织)、制造人工种子、单倍体育种(最大的
优点是
,得到的全为纯种)、筛选突变体、细胞产物的工厂化生产。
2植物体细胞杂交技术
(1)原理:
(2)过程:
去壁的方法:
诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电激等。化学法是用
作为诱导剂。
(3)意义:克服了(二)动物细胞工程
障碍。
动物细胞工程中常用的技术手段有



等,其中,
是其他技术的基础。
1动物细胞培养
(1)流程:取动物组织块→剪碎→用
处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→
转入培养瓶中进行培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
(2)悬液中分散的细胞很快就贴服在瓶壁上,称为细胞贴壁。细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。
(3)动物细胞培养需要满足以下条件①无菌、无毒的环r
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