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戊型肝炎病毒检测方法学评价
摘要目的为戊型肝炎病毒检测选择适当的方法。方法使用抗戊型肝炎病毒IgG(HEVIgG)和抗戊型肝炎病毒IgM(HEVIgM)检测方法对200份急性非甲非乙非丙型肝炎患者血清和200份健康人血清及50例散发性戊型肝炎患者血清进行检测。结果在急性非甲非乙型肝炎患者血清中,抗HEVIgG、抗HEVIgM和HEVRNA阳性率分别2550、1850和1650。在戊肝系列血清检测中,抗HEVIgG阳性率发病1个月内为740,发病3个月940,6个月380,12个月354,24个月86。抗HEVIgM阳性率发病1个月内为920,发病3个月340,6个月40,12个月10。抗HEVIgM在发病初期产生,多数在3个月阴转,即抗HEVIgM阳性是近期HEV感染的标志。而HEVIgG持续时间相对较长,多数于发病后6~12个月转阴,但亦有持续几年者。尽管大部分抗HEVIgM阳性血清抗HEVIgG也呈阳性,但也确有少数抗HEVIgG为阴性的。结论抗HEVIgM检测是诊断戊肝近期感染最重要的方法,抗HEVIgG检测对戊肝感染长期鉴别诊断最为重要。
关键词戊型肝炎病毒;戊肝病毒IgG;戊肝病毒IgM
戊型肝炎是由戊型肝炎病毒(HEV)引起,是一种单股正链RNA病毒,既往认为戊肝主要经消化道传播,由饮用被戊肝污染的水源或食用被污染的食物所致1。近年来,随着对戊肝传播途径的研究不断深入,经血液传播的直接和间接证据不断积累,为戊型肝炎病毒不同时期检测寻找合适的方法也至关重要。作者利用酶联免疫试验(ELISA)和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)分别检测了急性散发性戊肝血清中抗HEVIgG、IgM及HEVRNA。现报告如下。
1材料与方法
11血清标本患者血清来自濮阳市各医院住院患者,健康人血清来自濮阳正常人群。
12抗HEVIgG及IgM检测方法2用抗人IgGu链、抗人IgMu链包被反应板,每个样本待测孔加入样品稀释液100μl,再加入待测样本10μl。置37℃水浴30mi
;洗板5次,每孔加入酶结合物100μl,封板,置37℃水浴30mi
;洗板5次,每孔加入显色剂A、B液各50μl,封板,置37℃显色10mi
,每孔加终止液50μl,终止反应。在450
m波长处测吸光度A值,≥Cutoff值为阳性,反之为阴性。根据对200份健康人群血清检测,将Cutoff值定为025阴性对照平均值。
2结果
21急性非甲非乙非丙型肝炎血清抗HEVIgG、IgM及HEVRNA检测结果急性非甲非乙非丙型肝炎血清抗HEVIgG、IgM和HEVRNA检测共检测急性非甲非乙非丙型肝炎血清200份,健康人血清200份,结果见表1。在抗HEVIgM
f和HEVRNA均为阳性的血清中r
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