皮塞底端中间的缝隙里，然后小心地将滤纸条伸入盛有展开剂的大试管中，塞上橡皮塞，使滤纸垂直而两侧不接触试管内壁（否则会造成展开剂不按水平线平行上升，影响展开效果）；滤纸条的下端浸入溶液液面下约1cm（勿使试样斑点浸入溶液之中），如图61。塞好（注意密闭！）橡皮塞后，将大试管静置于试管架上，观察现象。记录酚酞与甲基橙完全分离开的时间，以及二者分开后的颜色与相对位置（前后）。
iv结束：取出滤纸条，立即用铅笔在展开剂到达的前沿处作一记号。如果酚酞显色不鲜明，这是因展开剂上升到一定高度，水分减少，NH3在无水情况下不能使酚酞显红色之故。可将取出的滤纸条用水蒸气熏片刻，然后再用浓氨水熏一下；或将滤纸条倒置（展开剂前沿向下），在展开剂前沿处滴少许氨水；或事先把滤纸条上部（要控制好上部位置）
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f用水润湿，待酚酞随正丁醇上升到被水润湿处则可显红色。（2）利用圆形滤纸进行层析（环形展开或径向展开）分别用圆形慢速、中速、快速定性滤纸按下列操作进行试验，并对比试验的效果。i准备：选好所需规格的圆形滤纸，滤纸的直径应比所用的培养皿（或其它浅皿）的直
径略大。再用宽1cm左右的滤纸条卷成直径为01502cm的滤纸芯。ii点样：取一张选好的（直径约9cm）圆形滤纸，在圆心位置上用玻璃毛细管点上酚酞
和甲基橙的混和溶液，点好的试样斑点直径约05cm，晾干。iii展开：在试样斑点的中心位置上用小铁钉穿一个小圆孔，小圆孔的直径约
01502cm。取一段长约15cm的滤纸芯，垂直插入小圆孔中，使滤纸芯的上端稍冒出滤纸平面。
量取约10ml氨水的正丁醇饱和溶液，注入直径为8cm的培养皿中，将准备好的圆形滤纸盖在培养皿上，使纸芯下端浸入展开剂中，再罩上培养皿盖。如图26所示。
静置，观察所发生的现象，记录观察到的现象和酚酞与甲基橙完全分离的时间。iv结束、取下圆形滤纸，其后的操作同（一）1（1）iv。以乙醇和氨水的混和溶液作展开剂（氨是显色剂）。（1）利用长条滤纸进行层析（上行展开）分别用长条形层析滤纸和中速定性滤纸进行试验，并对比试验的效果。除更换展开剂外，操作方法同（一）1（1）。（2）利用圆形滤纸进行层析（环形展开或径向展开）。分别用圆形慢速、中速、快速定性滤纸进行试验，并对比试验的效果。除更换展开剂之外，操作方法同（一）1（2）。3以氨化市售白酒作展开剂（氨是显色剂）。（1）利用长条滤纸进行层析（上行展开）分别用长条形层r