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专题5
一、【课题目标】（一）知识与技能1、了解PCR技术的基本操作2、理解PCR的原理3、讨论PCR的应用
DNA与蛋白质技术
课题52多聚酶链式反应扩增DNA片段
（二）过程与方法在多聚酶链式反应扩增DNA片段的实验过程中，应避免外源DNA污染，严格控制温度等反应条件（三）情感、态度与价值观通过对PCR实验的操作及结果分析，培养学生严谨的科学态度和实事求是的科研精神二、【课题重点】PCR的原理和PCR的基本操作三、【课题难点】PCR的原理四、【教学方法】启发式教学五、【教学工具】多媒体课件六、【教学过程】（一）引入新课在现代生物技术中，DNA技术可谓是尖端技术。人类基因组计划、基因工程、基因诊断、基因检测、古生物鉴定等都离不开对DNA分子碱基序列的分析。而分析DNA碱基序列，就需要一定量的DNA片段。怎样迅速获得足够量的DNA片段呢？今天我们来研究学习DNA分子的扩增技术——PCR技术。（二）进行新课1．基础知识PCR技术扩增DNA的过程，与细胞内DNA复制过程类似：1．1细胞内DNA复制条件分析：条件模板原料酶能量引物组分DNA的两条单链四种脱氧核苷酸解旋酶DNA聚合酶ATPRNA作用提供复制的模板合成DNA子链的原料打开DNA双螺旋催化合成DNA子链为解螺旋和合成子链供能为DNA聚合酶提供合成的3’端起点
1．2细胞内DNA复制过程（1）DNA的反向平行结构：（结合教材图5－6）
f核苷酸分子的结构与方向性：（分子结构模式图）由核苷酸通过35磷酸二酯键连接形成核苷酸长链：（模式图，体现方向性）。DNA双螺旋结构的反向平行结构：（2）DNA的复制过程解旋：解旋酶、ATP，DNA两条链打开，，形成两条DNA单链。
引物结合：在DNA单链3’端与DNA反向配对结合，确保引物3’端与DNA单链准确配对。DNA聚合酶结合：子链合成：DNA聚合酶从引物3’端开始，将配对的脱氧核苷酸连接起来。后续加工：DNA聚合酶I将引物切去，并合成空缺处的DNA单链，再由DNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来（半不连续合成。先导链，滞后链）子链合成特点：不能从头合成；合成方向为“5’→3’合成”。感悟生命的神秘：DNA聚合酶不但能够催化磷酸二酯键的形成，还具有校对功能。它在每引入一个核苷酸后都要复查一次，只有碱基配对无误后才能继续往下聚合，它不能从头合成。RNA聚合酶没有校对功能，因此RNA的合成不需要引物，r