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除外。
实验二制备土壤稀释液
一、实验目的:学习用浓度梯度法配置土壤稀释液二、实验仪器及试剂:电子天平、带有玻璃珠的三角瓶、摇床、1mL的无菌吸头、试管、无菌水、土样三、实验步骤:称取土样10g放入盛99mL无菌水并带有玻璃珠的三角瓶中,置摇床振荡5mi
使土样均匀分散在稀释液中成为土壤悬液(102)。用1mL的无菌吸头从中吸取05mL土壤悬液注入盛有45mL无菌水的试管中,吹吸3次,振荡混匀(103)。然后再用同一支1mL吸头,从此管中吸取05mL注入另一盛有45mL无菌水的试管中(104),依此类推制成105,106,各种稀释度的土壤溶液。
注:无菌操作:【火焰消毒】在无菌环境进行培养或做其它无菌工作时,首先要点燃酒精灯或煤气灯。以后一切操作,如按装吸管帽、打开或封闭瓶口等,都需在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意:金属器械不能在为焰中烧的时间过长,以防退火,烧过的金属镊要待冷却后才能挟取组织,以免造成组织损伤。吸取过营养液后的吸管不能再用火焰烧灼,因残留在吸管头中营养液能烧焦形成炭膜,再用时会把有害物带入营养液中。开启、关闭长有细胞的培养瓶时,火焰灭菌时间要短。防止因温度过高烧死细胞。另外胶塞过火焰时也不能时间长,以免烧焦产生有毒气体,危害培养细胞。【操作】进行培养时,动作要准确敏捷,但又不必太快,以防空气流动,增加污染机会。不能用手触及已消毒器皿,如已接触,要用火焰烧灼消毒或取备品更换。为拿取方便,工作台面上的用品要有合理的布局,原则上应是右手使用的东西放置在右侧,左手用品在左侧,酒精灯置于中央。工作由始至终要保持一定顺序性,组织或细胞在未做处理之前,勿过早暴露在空气中。同样,培养液在未用前,不要过早开瓶;用过之后如不再重复使用,应立即封闭瓶口直立可增加落菌机会。吸取营养液、PBS、细胞悬液及其它各种用液时,均应分别使用吸管,不能混用,以防扩大污染或导致细胞交叉污染。工作中不能面向操作野讲话或咳嗽,以免唾沫把细菌或支原体带入工作台面发生污染。操作前用酒精擦拭超净台面及双手。手或相对较脏的物品不能经过开放的瓶口上方,瓶口最易污染,加液时如吸管尖碰到瓶口,则应将吸管丢掉。
实验三培养基的制备
一实验目的学习细菌放线菌及真菌常规培养基的制备方法二实验内容牛肉膏蛋白胨培养基的制备高氏一号合成培养基的制备马铃薯蔗糖琼脂培养基的制备三实验原理培养基culturemedium是指利用人工方法将适合微生物生长繁殖或积累代谢r
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