产酶的一般工艺流程
保藏菌种
试管斜面培养(活化)摇瓶扩大培养
从原始菌种准备生产菌种
从原料准备培养基发酵过程管理
种子罐培养
培养基
发酵罐分离纯化
无菌空气
酶
21淀粉酶淀粉酶是能够水解糖苷键的一类酶的总称。它可分为a淀粉酶、β淀粉酶、
葡萄糖淀粉酶和异淀粉酶等。能产生淀粉酶的微生物很多,如枯草芽孢杆菌、马铃薯芽孢杆菌等分泌液化型淀粉酶,根霉、黑曲霉等能产生糖化型淀粉酶。
利用细菌生产a淀粉酶是以液体深层发酵为主。采用麸皮、玉米粉、豆饼粉、米糠和玉米浆等为原料,适当补充硫酸铵、氯化铵、磷酸铵等无机氮,添加少量镁盐、磷酸盐、钙盐等无机盐类。pH中性或微碱性,温度控制在27度,通气搅拌培养2448h。然后再经分离(除去菌体及不溶物)、浓缩、沉淀、干燥,即可得到淀粉酶制剂的成品2。
利用霉菌生产a淀粉酶多采用固体发酵。以麸皮为主要原料,酌加米糠或豆饼的碱水浸出液以补充氮源。pH微酸性,相对湿度90以上,3235度下通风培养3648h后,立即在40度下烘干或风干,即为工业生产用的粗酶。经粉碎、浸泡、分离、浓缩、沉淀和干燥等步骤可得到淀粉酶制剂的成品,其纯化方法有盐析法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法和柱层析法等22蛋白酶
蛋白酶是水解蛋白质肽键的酶类的总称。以产生菌的最适pH为标准,蛋白酶通常分为酸性、中性、碱性3大类型。产酸性蛋白酶的微生物以霉菌为主,如黑曲霉、根霉、青霉等;产中性蛋白酶的主要是枯草芽孢杆菌、灰色链霉菌或曲霉等;产碱性蛋白酶的主要是枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌等。蛋白酶已广泛应用于酶法皮革脱毛、丝绸脱胶精炼、加酶洗涤剂、蛋白胨制造、毛纺原料脱脂、皮毛软化、酶法制明胶、酱油酿造、医药工业和注射用水解蛋白的制造等。
利用黑曲霉生产酸性蛋白酶的培养基的基本组成是:豆饼粉、玉米粉、鱼粉(6:1:1)混合物5,豆饼石灰水物10,氯化铵1,氯化钙05磷酸氢二钠02,pH5560。
生产中性蛋白酶培养基的组成与碱性蛋白酶的相似,以葡萄糖、淀粉、饴糖、玉米粉、米糠和麸皮等作为碳源,以豆饼粉、鱼粉、血粉、酵母粉、胨和玉米浆
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f作为氮源,添加钙离子抖,镁离子、锌离子、锰离子等无机盐类。生产中性蛋白酶的培养基为微酸性,生产碱性蛋白酶的培养基为微碱性。利用霉菌、放线菌生产蛋白酶的最适温度为2830度;而培养芽孢杆菌则以3037度为最佳。通气培养有利于产酶。发酵结束后,要测定酶的活力,对成熟的酶液适当r