CCK8实验
1、在96孔板中配置100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时（37℃，5CO2）。2、向培养板加入10μl不同浓度的待测物质。3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：6、12、24或48小时）。4、向每孔加入10μlCCK8溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。5、将培养板在培养箱内孵育14小时。6、用酶标仪测定在450
m处的吸光度。7、若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10μl01M的HCL溶液或者1wvSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。
PS：1wvSDS溶液配制方法：组份浓度：10WVSDS配制量：100ml配制方法：1称量10g高纯度的SDS置于100200ml烧杯中，加入约80ml的去离子水，68℃加入溶解2滴加浓盐酸调节pH值至723将溶液定容至100ml后，室温保存。
f注意：如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK8之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。活力计算：细胞活力（％）A加药A（空白）A（0加药）A（空白）×100A（加药）：具有细胞、CCK8溶液和药物溶液的孔的吸光度A（空白）：具有培养基和CCK8溶液而没有细胞的孔的吸光度A（0加药）：具有细胞、CCK8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力
CCK8可以用于细胞增殖和毒性分析。其基本原理为该试剂中含有WST8，它在电子载体1MethoxyPMS的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒染料，生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比因此可以用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。其使用方法在增殖和毒性试验中有所区别细胞增殖试验1接种细胞悬液100微升于96孔板预先置于37度5CO2饱和湿度的培养箱内培养
f2在每孔内加入10微升的CCK8试剂3把培养板放培养箱内14小时根据细胞类型其时间有所不同4在450
m波长处测定吸光值参比波长为600
m或以上波长
毒性分析试验1接种100微升细胞悬液5000个孔于96孔板2预先放置37度5CO2饱和湿度培养箱培养24小时3加入10微升不同浓度的毒性物质到孔内培养基4在培养箱内培养48小时5在每孔内加入10微升CCK8试剂在培养箱内培养14小时6在450
m波长处测定吸光值参比波长为600
m或以上以上步骤摘自CCK8的说明书由于涉及到某些原因我省去了上面的一r