小鼠凋亡诱导因子试剂盒说明书,小鼠(AIF)ELISA试剂盒技术资料
本试剂仅供科研实验用!不用于临床!上海古朵生物专供!使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本凋亡诱导因子(AIF)含量。小鼠ELISAKit小鼠elisa试剂盒ELISA检测试剂盒凋亡诱导因子AIFELISA试剂盒操作步骤1标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为9μgml,6μgml,3μgml,15μgml,075μgml。2加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。5洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7温育:操作同3。8洗涤:操作同5。9显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟10终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11测定:以空白空调零,450
m波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。标本:血清或血浆
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