捣碎机均匀捣碎，用四分法缩分出适量试样，均分成两份，装入清洁容器内，加封后标记，一份作为试样，一份作为留样。42试样的保存将试样于18℃下保存。5测定步骤51提取称取约5g精确至001g试样于50mL聚丙烯离心管中，加入100mL磷酸盐缓冲液212均质2mi
，于平板振荡器上振荡提取10mi
，离心10mi
4500rmi
，将上清液转移到另一个50mL聚丙烯离心管中。在残渣中再加人100mL磷酸盐缓冲液212，重复上述操作，合并上清液，用10molL的盐酸调pH值为35士02，加人20mL七氟丁酸溶液210，涡旋混匀。52净化C18固相萃取柱用30mL甲醇21，3mL七氟丁酸溶液211淋洗后，将提取液加载在固相萃取柱上，控制流速约1滴s，先用3mL七氟丁酸溶液211淋洗，再用每次3mL水淋洗两次，弃去淋洗液，抽干5mi
。用5mL乙腈一七氟丁酸溶液2118020，体积比洗脱，收集洗脱液于精密刻度试管中，40℃氮气流挥去部分溶剂，用七氟丁酸溶液211定容至10mL涡旋混匀后，过02μm微孔滤膜，液相色谱一质谱质谱测定。53测定531标准工作曲线制备制备混合标准浓度系列，壮观霉素、双氢链霉素、链霉素、丁胺卡那霉素、卡那霉素、妥布霉素、庆大霉素分别为50
gmL，100
gmL，250
gmL，500
gmL，1000
gmL，新霉素、潮霉素B、安普霉素分别为300
gmL，
gmL，5001000
gmL，1500
gmL，2000
gmL，按532条件测定并制作标准曲线，10种氨基糖苷类药物的CAS号和在532色谱条件下测得的色谱保留时间参见表B1。532液相色谱条件a色谱柱：C18柱可用I
tersilODS3，粒径5μm，柱长150mm，内径46mm或相当者；b流动相：甲醇水100mmolLHFBA（梯度洗脱），流动相组成和洗脱梯度见表1；时间mi
甲醇水100mmolHFBA005752005575201060202012070102012180020
f150800201515752035057520c流速：03mLmi
；d柱温：30℃；e）进样量：30μL。533质谱条件参见附录A。534液相色谱一串联质谱测定5341定性测定按照上述条件测定样品和建立标准工作曲线，如果样品中化合物质量色谱峰的保留时间与标准溶相比在士25的允许偏差之内；待测化合物的定性离子对的重构离子色谱峰的信噪比大于或或等于3（SN≥3，定量离子对的重构离子色谱峰的信噪比大于或或等于10（SN≥10；定性离子对的相对丰度与浓度相当的标准溶液相比，相对丰度偏差不超过表2的规定，则可判断样品中存在相应的目标化合物。10种氨基糖苷类药物标准工作溶液的定量离子对的重构离子色谱参见图r