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卡介菌多糖核酸对正常小鼠免疫功能影响的研究摘要:目的:研究卡介菌多糖核酸对正常小鼠免疫功能的影响。方法:将icr小鼠随机分成照组和125、25、50mgkgbw3个剂量组。肌内注射28天,进行胸腺指数、脾脏指数、细胞免疫、体液免疫、单核巨噬细胞活性的测定。结果:高剂量组胸腺指数显著高于对照组,高剂量组促进淋巴细胞增值能力,中、高剂量组提高小鼠巨噬细胞吞噬功能,对脾脏指数无影响。结论:卡介菌多糖核酸具有增强小鼠免疫功能作用。关键词:卡介菌多糖核酸;细胞免疫;体液免疫【中图分类号】r37891【文献标识码】a【文章编号】16747526(2012)08043701我国自主研制的卡介菌多糖核酸(bcgps
),是将卡介苗进行纯化,通过热酚法提取其有效成分(多糖、核酸等),配以灭菌的生理盐水制成的免疫调节剂,bcgps
的成功研制,填补我国卡介苗系列产品的空白1。临床上广泛用于预防和治疗慢性气管炎、感冒、哮喘、病毒感染性疾病、自身免疫性疾病。本实验是以卡介菌多糖核酸为研究对象,研究其对正常小鼠脾脏指数、胸腺指数、细胞免疫、体液免疫和巨噬细胞活性的影响。探讨卡介菌多糖核酸的作用机制。1材料与方法11药品与试剂:卡介菌多糖核酸注射液、刀豆蛋白a、脂多糖、mtt、dmso、支链淀粉、pbs(ph74)、中性红、台酚蓝、imdm培养
f液。12实验动物:icr小鼠,68周龄1822g,雌性120只。13仪器:离心机,酶标仪,细胞培养箱,电子天平,倒置显微
镜。14方法141给予受试动物途径:实验动物分成4组,每组30只小鼠,
分别注射卡介菌多糖核酸低、中、高三个剂量组(125mgkg、25mgkg、50mgkg)和对照组(生理盐水),肌内注射,每周2次,持续4周。
142小鼠t、b淋巴细胞转化功能的测定:每组取10只小鼠,脱臼处死,制备脾细胞悬液。imdm洗涤细胞,调整细胞浓度,每个样品设3个重复,每孔100μl培养于96孔培养板,每孔加co
a100μl和lps100μl,每组设1个空白对照。37℃,5co2孵箱内培养细胞48h。加入mtt10μl孔,继续培养4小时。弃上清,加入dmso100μl孔,溶解颗粒。用酶标仪测定波长450
m处od值,计算t,b淋巴细胞的转化功能。
143小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的检测1431小鼠腹腔巨噬细胞制备和培养:每组取10只小鼠,腹腔注射支链淀粉(50gl)2ml只,3天后处死,收集腹腔细胞,pbs洗涤细胞,弃上清,用含10胎牛血清的imdm悬浮细胞,调整细胞浓度至1×106ml,每孔接种100μl培养2h。弃上清液,用imdm培养液漂洗,37℃,5co2细胞培养r
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