全球旧事资料 分类
植物组织培养实验指导
20133
f附录
培养基母液的配制(实验老师准备)
一、实验目的:掌握培养基母液配制的方法。二、实验原理:配制培养基时,为了使用方便和用量准确,通常采用母液法进行配制,即将所选培养基配方中各试剂的用量,扩大若干倍后再准确称量,分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存,使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。以MS培养基为例,所需配制的母液可分为:MS大量元素母液、MS微量元素母液、MS铁盐母液和MS有机化合物母液等。另外,还要配制生长物质母液,在不同类型的培养基中使用。三、实验器具与药品:电子分析天平、托盘天平、烧杯(50ml100ml500ml1000ml)量筒、(1000ml100ml25ml)容量瓶、(1000ml500ml100ml)、药勺、称量纸、玻璃棒、滴管、电炉、冰箱。配制MS培养基所需药品按培养基的配方准备。植物生长调节物质,24DNAA6BA等。四、培养基母液的配制过程首先,按下表“MS培养基母液的配制”,将各种母液根据各自的扩大倍数,计算出扩大后的称取量,然后,分别进行药品称取和母液配制。母液种类成分规定用扩大量mlL倍数称取量母液定配1LMSmg容体积培养基吸ml大量元素KNO3NH4NO3MgSO42O7HKH2PO4CaCl22O2H4H微量元素M
SO42OZ
SO42O7HH3BO31900165037017044022386621000203800033000740034008800223008600620010001100050取量ml
2
fKINa2MoO42O2HCuSO42O5HCoCl22O6H铁盐NaEDTAFeSO42O7H维生素和烟酸氨基酸甘氨酸VitB1VitB6肌醇
0830250025002537327805200105100100100
830250252537302780251005255000100010100010
(1)MS大量元素母液的配制按照MS培养基配方的用量扩大20倍,将大量元素配制成20倍的母液。配制时先用量筒量取蒸馏水800ml,放入1000ml的烧杯中,依次分别称取KNO338gNH4NO333gMgSO42O74gKH2PO434gCaCl22O88g,按顺序先后倒7H2H入烧杯中,用玻璃棒搅动,待第一种化合物溶解后再加入第二种化合物,当最后一种化合物完全溶解后,将溶液倒入1000ml的容量瓶,用蒸馏水定容至1000ml然后,倒入细口磨砂试剂瓶中,贴上标签,注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于4℃冰箱保存备用。配制培养基时每升MS培养基吸取该母液量为50ml。(2)MS微量元素母液的配制将MS培养基配方中微量元素的无机盐用量分别扩大1000倍,用电子天平分别依次称取M
SO42O223g,Z
SO42O86gH3BO362g,KI083g,4H7HNa2MoO42O025g,CuSO42O0025g,CoCl22O0025g,并用重蒸水逐2H5H6H个溶解,待全部溶解r
好听全球资料 返回顶部