（5）特点：指数2
形式扩增
第二步：基因表达载体的构建核心
1目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。
2组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因
（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转
录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。
第1页共8页
f（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。第三步：将目的基因导入受体细胞_1转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术。方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交DNADNA技术。2其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是采用分子杂交DNARNA技术。3最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是采用抗原抗体杂交技术。4有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如生物抗虫或抗病的鉴定等。（三）基因工程的应用1植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。2动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物。3基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。4基因诊断：又称为DNA诊断，是采用基因检测的方法来判断患者是否出现了基因异常或携带病原体。（四）蛋白质工程的概念蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求r