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微滴PCR技术的研究进展
作者：胡瑞丽杜亚楠赵凯施伟赵笑任方方吴洋洋唐雪明来源：《农村经济与科技》2016年第14期
摘要微滴PCR（microdropletPCR）技术结合了PCR技术和乳化技术，该技术在乳化剂中进行，是一种新型的核酸扩增技术。它可以高效、高通量地扩增DNA分子，在生命科学研究领域得到了广泛的应用。文章就微滴PCR技术的基本原理、建立与发展及其应用作一综述。关键词微滴PCR发展应用中图分类号S562文献标识码A1983年美国PE_Cetus公司的KBMullis和RKSaiki等人发明了聚合酶链式反应（polymerasechai
reactio
，简称PCR）技术，PCR技术自从被发明以后，就受到了非常高的重视，该技术作为分子生物学技术的一项重要里程碑，其特异性很强，灵敏度也很高，操作简单，重复性也非常好。该技术已经在很多领域（比如分子生物学研究，法医鉴定，还有临床诊断等）有着非常普遍的应用。但是，传统的PCR技术也存在以下的一些缺点：非特异性产物扩增的出现、引物二聚体的形成等，同时操作过程时间较长，容易受到污染从而出现假阳性或假阴性进而影响实验结果。为克服这些缺点，传统的PCR技术一直在被不断的改良和完善，已经发展起来的技术有荧光定量PCR（FQPCR）、巢式PCR、多重PCR、PCR酶联免疫吸附试验（ELISA）等。最近一种微滴PCR（microdropletPCR）技术成为研究的热点，以此为基础的新一代PCR系统，其结果的精确度、准确度和灵敏度比传统PCR以及定量PCR更好，因此很适于用来检测微拷贝数和基因突变率等。相信微滴PCR技术一定会在基础研究领域和临床诊断方面有着光明的应用前景。1微滴PCR技术的基本原理及其发展11微滴PCR技术的基本原理微滴PCR是利用油包水乳液体系中的微液滴作为反应器进行PCR扩增。微滴PCR与其他PCR技术相比最大的一个区别就是该技术可以形成很多的独立的微滴作为微反应器来进行PCR反应。该技术的关键在于，在PCR反应前，将包含PCR反应的水溶液在一定时间内缓缓注入到恒定转速旋转的矿物油表面，水溶液瞬间被矿物油包裹，最后形成数以万计油包水的微液滴。在理想状态下，一个微液滴内只分布一个DNA模板，每个微液滴就是一个PCR反应空间。这些反应可以在相同的条件下平行地进行扩增，同时进行多重PCR。提高了目标扩增的通量，同时减少了宝贵的试剂和样品的消耗，避免了普通多重PCR不同引物和模板间的相互干扰，产生扩增效率的不一致和非特异性产物的出现。
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