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×105=234×108。3因为菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成,所以实际活菌数量要比测得的
f数量多。
1.筛选菌株的原理微生物的选择培养:在选择培养基的配方中,把尿素作为培养基中的唯一氮源,原则上只有能够利用尿素的微生物才能够生长。2.统计菌落数目的方法1显微镜直接计数法①原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。②方法:用计数板计算。③缺点:不能区分死菌与活菌。2间接计数法活菌计数法①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。②操作:a设置重复组,增强实验的说服力与准确性。b.为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。③计算公式:每克样品中的菌株数=C÷V×M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积mL,M代表稀释倍数。3.鉴定分解尿素的细菌1原理:CONH22+H2O——→CO2+2NH3;由于NH3的产生,培养基碱性增强,pH升高,因此可通过检测pH的变化来判断该化学反应是否发生。2方法:以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌,若指示剂变红,则pH升高,说明该种细菌能分解尿素。4.对照原则的运用1判断培养基中是否有杂菌污染,需将未接种的培养基同时进行培养。2判断选择培养基是否具有筛选作用,需设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养,观察两种培养基上菌落数目,进行对比得出结论。考点三分解纤维素的微生物的分离
脲酶
1.纤维素酶1组成:一种复合酶,它至少包括三种组分,即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶。2作用:纤维素——→纤维二糖——→葡萄糖C酶苷酶
x
C1酶
葡萄糖
2.筛选方法1方法:刚果红染色法,即通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。2培养基:以纤维素为唯一碳源的选择培养基。3.筛选流程土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选
f产生透明圈的菌落。易错警示对选择培养基的选择方法区分不清1在培养基中加入某种化学物质。例如,加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌;加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在主要营养成分完整的基础上加入。2改变培养基中的营养成分。例如缺乏氮源时可以分离出固氮微生物;石油作为唯一碳源时,可以分离出能消除石油污染的微r
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