删去，代之以高保真的DNA链。
［思考］DNA分子能准确复制的原因有哪些？
DNA双螺旋结构提供模板；碱基互补配对；DNA聚合酶的复查功能。
［思考］细胞内哪些物质是从头合成的？RNA合成、蛋白质合成。
1．3DNA分子复制的人工控制
解开螺旋：在80～100℃时，DNA双螺旋打开，形成两条DNA单链，称为变性。
恢复螺旋：在50℃左右时，两条DNA单链重新形成双螺旋结构，称为复性。
复制条件：缓冲液DNA模板四种脱氧核苷酸热稳定DNA聚合酶两种引物。
反应场所：PCR仪（自动温度周期性调节）。
［思考］缓冲液相当细胞内的什么成分？（核基质）4．PCR的反应过程
变性
复性
延伸
变性：在95℃时DNA解旋复性：在50℃时引物与DNA单链结合延伸：在72℃时合成DNA子链（两个引物间的序列）2．实验操作2．1PCR反应体系：缓冲液、DNA模板，四种脱氧核苷酸原料、热稳定DNA聚合酶、两种RNA引物，水2．2实验操作步骤2．3按照PCR反应体系配方配制反应液；（2）将PCR反应体系50μL用微量移液器转移到微量离心管（05mL）中；（3）将微量离心管放到PCR仪中；（4）设置PCR仪的工作参数。（5）DNA在PCR仪中大量扩增。2．4水浴法：将微型离心管依次在95℃、55℃、72℃的恒温水浴锅中循环处理相应时间。3．实验注意事项3．1避免外源DNA污染：所用仪器、缓冲液、蒸馏水等使用前高压灭菌。3．2缓冲液和酶分装成小份，－20℃低温保存。
3
f3．3每添加一种反应成分，更换一个移液器的枪头。3．4混匀后离心处理，使反应液集中在离心管底部。4．结果分析与评价4．1反应液稀释：取2LPCR反应液，添加98L蒸馏水；2．分光光度计调零：将100L蒸馏水添加到比色杯中，在260
m处将分光光度计调整读数为零。4．2将100L反应稀释液倒入比色杯中，测定在260
m处的光吸收值。4．3计算：DNA含量＝50×光吸收值×稀释倍数（三）课堂总结、点评
多聚酶
PCR原理
DNA的复制需要酶、原料、能量、引物DNA的变性和复性受温度影响
链
式反
PCR过程
变性
复性
延伸
应
扩增
操作步骤
配制PCR反应体系
移入离心管
DNA扩增
设置工作参数
放入PCR
片
段
测定含量
稀释调零测定并读数计算
DNA
（四）实例探究
例1在（）的温度范围内，DNA的双螺旋结构解开
A10－20℃B80－100℃
C20－30℃D40－60℃
解析：蛋白质大多不能忍受60－80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。
答案：B
例2关于DNA的复制，下列叙述正确的是（）
ADNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从5’端延伸DNA链
BDNA复r