Ultimate3000型高效液相色谱仪操作规程
一、开机前的准备工作1检查设备电源、流路、信号连接是否完好。2流动相:配制相应的流动相,经045m微孔滤膜抽真空过滤后,超声脱气
15分钟,必须使用色谱纯的溶剂,水或缓冲盐溶液要用超纯水;盛放样品溶液和流动相所用的玻璃容器必须用超纯水清洗。3样品溶液:按方法取样或配制标准样品溶液,045m滤膜过滤。
二、仪器的组成及开机平衡系统1仪器组成:本仪器由Ultimate3000分离单元、DAD3000(RS)检测器、
Chromeleo
7色谱工作站和打印机组成。Ultimate3000分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统,四通道在线真空脱气机,可容纳120个样品瓶的自动进样系统,柱温箱,内置的柱塞密封垫清洗系统,溶剂托盘,液晶显示器,键盘用户界面及软盘驱动器。2开机:依次接通Ultimate3000分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。接通Ultimate3000分离单元后,仪器开始自检约20s,打开电脑,双击电脑右下角的变色龙软件的服务管理器,单击“启动Chromeleo
仪器控制器”,激活服务管理器,双击电脑桌面的“Chromeleo
7”图标,进入变色龙软件。3脱气(Degasssger):向上掀开泵头前面板,拧松快速清洗阀(逆时针两圈左右),然后按“冲洗”键,泵将以30mlmi
的速度自动快速清洗泵类残留的气泡,5mi
将自动停止。若想手动停止,只要再按“冲洗”键,将停止清洗。4清洗有缓冲盐的那个通道前后,一定要用超纯水清洗管路和泵头,以防止缓冲盐溶液直接与纯有机相混合而产生结晶堵塞比例阀。5清洗完毕,先停泵,再拧紧快速清洗阀。切记不要在泵未停止清洗前拧紧快速清洗阀。
三、编辑仪器方法1在Chromeleo
Co
sole“创建”菜单中点击“仪器方法”。2采集时间和采集通道设置:在弹出的“仪器方法向导”窗口中输入分析运行时
f间;在“诊断通道”项下点击“取消选择所有通道”,点击下一步。3LPG3400SD泵常规设置:在溶剂名称下面的方框中输入所用流动相的名字,
如“A:水,D:甲醇”。4在“压力限值”处的压力下限设置为5bar左右,可防治流动相走完时,仪器空
走。压力上限设置为400bar。5最大流速加速度和减速度可设置为3mlmi
2,点击下一步。6泵流速梯度的设定:在“流速梯度”窗口中,图示为所设定的梯度曲线,下表
中列有时间、流速、各通道流动相比例及梯度曲线。点击“删除平衡阶段”,然后再各项下输入相应值,在设定梯度过程中可以点击右边的“插入”行和“删除”行进行编辑。对反相色谱而言,一般梯度过程为水系比r