1革兰氏染色的机理和步骤机理：G、G主要由其CW化学成分的差异而引起对乙醇的通透性，抗脱色能力的差异。主要有肽聚糖的厚度和结构所决定。G的CW肽聚糖层厚，脂质含量低。乙醇脱色时CW脱水，孔径减少，透性降低，不易脱色，呈初染得蓝紫色。G的CW：肽聚糖层薄，脂质含量高。乙醇脱色时，类脂被乙醇溶解，透性升高，细胞被复染显红色。步骤：①涂片：在干净的载玻片上滴一滴水，用接种环挑取菌体均匀涂布于水中。
②固定：将玻片靠近酒精灯火焰，蒸干水分，但不要烤焦。③初染：用碱性颜料结晶紫对菌液涂片进行初染。④媒染以碘液媒染1mi
，水洗，吸干水分。细胞内形成结晶紫与碘的复合物，增强相互作用）⑤脱色关键步骤）：以95的乙醇脱色30s，应适当振荡均匀，是乙醇脱色完全。⑥水洗，吸干。⑦复染：第2张）复染30s，水洗吸干。⑧干燥镜检。2、用渗透皮层膨胀学说解说芽孢耐热机制。芽孢的耐热性在于芽孢衣对多价阳离子和水分的透性很差，以及皮层的离子强度很高，这就使皮层产生了极高的渗透压去夺取芽孢核心中水分，其结果造成皮层的充分膨胀和核心的高度失水，正是这种
f失水的核心才赋予芽孢极强的耐热性。3、引起微生物培养过程中PH变化的几种可能反应，并说明如何能够维持微培PH稳定。答：培养过程中，由于营养物质被分解利用，代谢产物的形成与积累，会导致PH变化。（第2张中的图）还与培养基的CN比有关，CN高，经培养基后PH显著下降，CN低，经培养基后PH明显上升。PH调节：①加入缓冲剂常用一氢二氢磷酸盐，K2HPO4呈碱性，KH2PO4酸性，只在一定的PH范围内调节（6472）②大量产酸的菌株，加CaCO3调节，CaCO3难溶于水，不会使培养液的PH过度增加，但可不断中和微生物产的酸。③培养液中存在天然的缓冲系统，如AA，肽，Pr均属两性电解质，也起缓冲的作用。④过酸：治标加NaOH、Na2CO3中和，治本加适量氮源：NaNO3、Pr、NH3H2O；增加通风量。⑤过碱：治标H2SO4、HCl中和，治本加适量碳源G类，脂类减小通风量。3、抗生素法和菌丝过滤法为何能浓缩营养缺陷型突变株？抗生素法（青霉素法）：适用于细菌。原理：青霉素抑制肽聚糖链间的交联，组织了合成完整的CW，野生型B处于正常生长繁殖，所以对青霉素敏感，可被抑制或杀死；营缺B在基本培养基上休眠状态
f存活下来，从而达到浓缩营缺型目的。制霉菌素法适用于真菌，其可与cm上？（第1张）醇作用，引起cm损伤，因为它只能杀死生长繁殖r