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比较了培养条件对白芨种子萌发的效应。本试验通过改变植物生长调节剂组合及其浓度配比,比较了植物生长调节剂对白芨种子萌发的影响,筛选丛生芽增殖培养和生根培养的最佳培养基,旨在为建立无性繁殖体系、实现白芨快速繁殖和工厂化生产提供理论依据。
1材料与方法
11材料及处理
白芨种子及其无菌苗以及植物生长调节剂NAA、6BA、2,4D、GA3由生物资源保护与利用湖北省重点实验室提供;选取白芨种子作为外植体,流水冲洗2h后用滤纸吸干水分,在超净工作台上用75乙醇浸泡30s左右,然后用01的升汞振荡消毒3mi
,去离子水清洗5次,再接种到培养基中。
12基本培养条件
试验里基本培养基均为MS培养基,加蔗糖25mgL、琼脂65mgL、活性炭1mgL;培养室内的环境条件均为温度25~28℃,光照度1800lx,光照时间10hd。
13培养方法
131种子萌发培养基筛选在MS基本培养基里添加不同浓度的NAA(01、02、03、04mgL)和6BA(10、12、14、16、18、20mgL)两两组合,有24个处理,另设一空白对照(CK1),共25个处理,处理编号1~25,每个处理接种10瓶,将准备好的白芨种子随机选取10粒,用移液枪均匀地接种在含有不同植物生长调节剂组合的培养基上,培养条件为前述的基本培养条件。20d后观察培养结果,以筛选出白芨种子萌发的最佳培养基。
132愈伤组织诱导培养基筛选切取白芨种子萌发的无菌苗茎段(约05cm)作为外植体,接种至MS培养基中,添加不同浓度的6BA(05、10、15、20mgL)和2,4D(05、10、15、20mgL)两两组合,有16个处理,另设一空白对照(CK2),共17个处理,处理编号26~42,每个处理接种10个外植体,10次重复,置于培养室中培养,培养条件同上,30d后计算其诱导率。
133丛生芽增殖培养基筛选将白芨的愈伤组织接种至MS培养基中,添加不同浓度的6BA(05、10、15、20mgL)和NAA(010、015、020mgL)两两组合,有12个处理,另设一空白对照(CK3),共13个处理,处理编号43~55,每个处理接种3个外植体,10次重复,置于培养室中培养,记录丛生芽的增殖情况,到60d计算诱导率。
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134生根培养基筛选剪取上述培养得到的单根芽,接种到MS培养基中,附加不同浓度的GA3(0、02、03、04、05、06mgL),共6个处理,处理编号56~61,置于培养室中培养,培养条件同上,培养25d后观察白芨丛生单根芽的生根状况,筛选适合白芨丛生单根芽生根的最佳培养基。
14炼苗移栽
选取生长旺盛、叶片多且根系发达的白芨组培r
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