土壤微生物生物量的测定方法
1土壤微生物碳的测定方法（熏蒸提取仪器分析法）
11基本原理
新鲜土样经氯仿熏蒸后（24h），土壤微生物死亡细胞发生裂解，释放出微生物生物量碳，用一定体积的05molLK2SO4溶液提取土壤，借用有机碳自动分析仪测定微生物生物量碳含量。根据熏蒸土壤与未熏蒸土壤测定有机碳的差值及转换系数（KEC），从而计算土壤微生物生物量碳。
12实验仪器
自动总有机碳（TOC）分析仪（ShimadzuModelTOC500JANPAN）、真空干燥器、烧杯、三角瓶、聚乙烯熟料管、离心管、滤纸、漏斗等。
13实验试剂
1）无乙醇氯仿（CHCL3）；2）05molL硫酸钾溶液：称取87gK2SO4溶于1L蒸馏水中3）工作曲线的配制：用05molL硫酸钾溶液配制10ugCL、30ugCL、50ugCL、70ugCL、100ugCL系列标准碳溶液。（其实一般情况下，仪器会自带的标曲，一般不用自己做的）
14操作步骤
141土壤的前处理（过筛和水分调节略）142熏蒸称取新鲜（相当于干土100g，这个可以根据自己土样的情况而定）3份分别放入25ml小烧杯中。将烧杯放入真空干燥器中，并放置盛有无乙醇氯仿（约23）的15ml烧杯2或3只，烧杯内放入少量防暴沸玻璃珠，同时放入一盛有NaOH溶液的小烧杯，以吸收熏蒸过程中释放出来的CO2，干燥器底部加入少量水以保持容器湿度。盖上真空干燥器盖子，用真空泵抽真空，使氯仿沸腾5分钟。关闭真空干燥器阀门，于25℃黑暗条件下培养24小时。142抽真空处理
f熏蒸结束后，打开真空干燥器阀门（应听到空气进入的声音，否则熏蒸不完全，重做），取出盛有氯仿（可重复利用）和稀NaOH溶液的小烧杯，清洁干燥器，反复抽真空（5或6次，每次3mi
，每次抽真空后最好完全打开干燥器盖子），直到土壤无氯仿味道为止。同时，另称等量的3份土壤，置于另一干燥器中为不熏蒸对照处理。（注意：熏蒸后不可久放，应该快速浸提）144浸提过滤从干燥器中取出熏蒸和未熏蒸土样，将土样完全转移到80ml聚乙烯离心管中，加入40ml05molL硫酸钾溶液（土水比为14，考虑到土样的原因，此部分熏蒸和不熏蒸土均为4g，即，4g土：16ml的硫酸钾溶液，当然这个加入量要根据TOC仪器的进入量决定）300rmi
振荡30mi
，用中速定量滤纸过滤。同时作3个无土壤基质空白。土壤提取液最好立即分析，或20℃冷冻保存（但使用前需解冻摇匀）（注意这部分很重要，有研究结果表明：提取液如果不立即分析，请保存在20℃，否则将影响浸提液的效果，其次，过滤时不要用普通的定性或定量滤纸，以免长久r