江苏省盐城市时杨中学高二下学期生物《基因工程DNA重组技术的基本工具》导学案人教版
编制：沈洪霞审核：批准：备注【学习目标】1、简述基因工程的概念含义。2、简述基因工程的原理。3、说出DNA重组技术的基本工具及其作用、特点。
【问题情境】1、什么叫基因工程？
2、基因工程的基本工具有哪些？
3、限制性核酸内切酶切割的是DNA特定部位的2个核苷酸之间的氢键还是磷酸二酯键？
4、最简单的质粒载体必须包括哪三个部分？
【我的疑问】
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f【自主探究】一、基因工程的概念和原理1、基因工程是在此又叫做2、基因工程的原理是：二、基因工程的工具1、限制性核酸内切酶“分子手术刀”（1）分布：微生物。（2）特点：一种限制酶只能识别一种特定的定部位的2个核苷酸之间的切开键。；并在特水平上操作、改变生物遗传性状的技术，因。。
备
注
例：EcoRI只能识别GAATTC碱基序列，切割的是GA之间的键。（4）DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段，末端通常有两种形式，即和。2、DNA连接酶“分子缝合针”（1）分类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为EcoliDNA连接酶。
EcoliDNA连接酶只能将
连接起来，不能将双链
DNA片段平口末端之间进行连接；另一类是从T4噬菌体分离出来的，称为T4DNA连接酶。T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的，又可以“缝合”双链DNA片段的，但连接之间的效率比较低。键。导入受体细胞。（2）DNA连接酶连接的是3、载体“分子运输车”（1）载体的作用：将切割下来的（2）作为载体必须具备以下条件：①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存；②具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接；③具有某些标记基因，便于进行筛选，如对抗生素的抗性基因。（3）目前通常使用的载体是和等。，它是一种相对分子质量较小、独立于拟核DNA之外的环状DNA分子。其他载体还有
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f【课堂检测】例1、以下是两种限制酶切割后形成的DNA片段，分析回答问题。
备
注
1其中①和是由一种限制酶切割形成的末端，两者要重组成一个DNA分子，所用DNA连接酶通常是。2和是由另一种限制酶切割形成的末端，两者要形成重组DNA片段，所用DNA连接酶通常是。例2、治疗糖尿病用的胰岛素，在过去主要是从动物如猪、牛体获得的。自20世纪70年代基因工程发展起来以后，人们开始采用高新技术生产胰岛素，其操作过程如图所示：
1图中的质粒存在于细菌细胞中，从其分子r