溶血性实验
实验目的：通过本实验认识溶血现象，并掌握溶血性实验常规的体外试管法
的基本操作
实验原理：溶血是指红细胞破裂、溶解的一种现象。药物制剂引起的溶血反
应包括免疫性溶血与非免疫性溶血。免疫性溶血是药物通过免疫反应产生抗体而
引起的溶血，为II型和III型变态反应；非免疫性溶血包括药物为诱发因素导
致的氧化性溶血和药物制剂引起的血液稳定性改变而出现的溶血和红细胞凝聚
等。溶血实验室观察受试物是否会引起溶血和红细胞聚集等反应。
有些药物由于含有溶血性成分或物理、化学、生物等方面的原因，在直接注
射入血管后可产生溶血现象；有些药物注入血管后可产生血细胞凝聚，引起血液
循环功能的障碍等。有些中草药含有皂苷等成分，具有溶血作用。凡是注射剂和
可能引起免疫性溶血或非免疫性溶血的药物制剂，均应进行溶血性实验。
实验方法
12红细胞悬液的制备取新鲜鼠血1020ml，放入盛有玻璃珠的三角烧瓶
中振摇10分钟，或用玻璃棒搅动血液，除去纤维蛋白质，使成脱纤血液。
加入生理盐水100ml，摇匀，10001500rmi
离心15分钟，除去上清液，
沉淀的红细胞再用生理盐水按上述方法洗涤23次，至上清液不显红色为止。
将所得红细胞用生理盐水配成2的混悬液红细胞2ml，加生理盐水至
100ml，供试验用。
2取10ml干净玻璃试管7支，编号，1至5号管为供试品，6号管为阴性对照
管，7号管为阳性对照管完全溶血对照。按表1所示，依次加入2红细胞
悬液。0。9氯化钠溶液或蒸馏水，混匀后，立即置37±0。5℃的恒温水
浴中进行温育，观察并记录各管的溶血情况。开始每隔15分钟观察1次，1
小时后，每隔1小时观察1次，一般观察3小时。
表1溶血实验设计表
试管编号
1
2
3
4
5
6
7
2红细胞悬液ml25
25
25
25
25
25
25
生理盐水ml
20
21
22
23
24
25
蒸馏水ml
25
5药液ml
05
04
03
02
01
f表2溶血试验结果判断标准
全溶血
溶液澄明，红色，管底无红细胞残留
部分溶血不溶血红细胞凝聚
溶液澄明，，红色或棕色，底部有少量红细胞残留镜检红细胞稀少或变形红细胞全部下沉，上清液体无色澄明镜检红细胞不凝聚溶液中有棕红色或红棕色絮状沉淀，振摇后不分散
当阴性对照管无溶血和凝聚发生，阳性对照管有溶血发生时，若受试物管中的溶液在3小时内不发生溶血和凝聚，则受试物可以注射使用，若受试物中的溶液在3小时内发生溶血
或聚集，则受试物不能注射使用。
时间（h）05ml
04ml
5鞣质03ml
02ml
025
05
075
1
2
r