握梯度稀释法、平板划线法和斜面接种等方面的无菌操作技术，熟悉对微生物观察与研究的方法，如影印法观察放线菌，革兰氏染色法观察细菌，分光光度计计数法研究细菌的理化性质（pH）等。微生物与人类息息相关，它对人类的假定贡献和无法估量的开发潜力。为我们展开了广阔的应用前景，所以研究微生物的生命活动有着重要意义，其中
1
为了更好地为人类的生活和健康做出更大的贡献，将pH与微生物的生命活动有密切联系。进一步探究pH对微生物的影响。为了更好地为人类的生活和健康做出更大的贡献，将进一步探究pH对微生物的影响。
1材料与方法1材料与方法
11材料
研究材料：土壤（于实验前采集后马上进行稀释，制备菌悬液）
12方法
梯度稀释法（稀释）121梯度稀释法（稀释）A称取土样200g，在火焰旁加到一个盛有48ml无菌水并装有玻璃珠的100ml锥形瓶中。振荡2030mi
，使样品中的菌体、芽孢或孢子均匀分散。静止2030s，标记为编号1。B按照一定的梯度进行稀释（该实验采用20倍梯度）①取3个各装有95ml无菌水的25ml锥形瓶，分别按照顺序标记好2、3、4②在无菌操作台上，用微量移液器从1号锥形瓶中移取05ml土壤悬液加到2号锥形瓶中，摇匀后，再用微量移液器从2号锥形瓶中移取05ml土壤悬液加到3号锥形瓶中，依此类推，分别将土壤悬液稀释20、400、8000倍
2
f③然后将4个锥形瓶的悬液分别涂布在已经制备好的牛肉膏蛋白胨平板和高氏1号平板上（分别编号14），置于28度培养箱中培养（细菌培养2d，放线菌培养3d）平板划线法（纯化）122平板划线法（纯化）采用平板划线法的分区划线法。将平板分四个区域，其中第四区是单菌落的主要分布区域。先将接种环沾取少量菌在平板第一区划若干平行线，将接种环上多余菌体烧死。平板转动6070后，再以第一区划线的菌体为菌源，由第一区向第二区作第二次的平行划线，依次在第三区和第四区划线。斜面接种技术（保存）123斜面接种技术（保存）取接种环→接种环冷却、取菌→接种→培养影印法（观察）124影印法（观察）在最后划线的培养基用小刀小心地铲一个单菌落，翻过压印在载玻片中央，小心地移开菌落，载玻片中央就留下了菌落印痕。在火焰下固定，滴一滴石炭酸复红染色液染1分钟，水洗晾干，至于高倍镜或油镜下观察。革兰氏染色法（观察）125革兰氏染色法（观察）1251制片细菌涂片→固定→结晶紫初染→碘液媒染→乙醇脱色→番红复染→观察12521252镜检将染色后的载玻片，先r