了低敏感性和低特异性的问题。1999年,Nicholso
等1提出了“代谢组学”(metabo
omics)的概念,将其定义为“对新陈代谢过程中所有低分子量(
1对象与方法
11研究对象
胃镜和病理检查证实的16例早期胃癌实验组,20例健康对照组。实验组平均年龄(63±8)岁,男性12例,女性4例。对照组平均年龄(61±5)岁,男性8例,女性12例。由于代谢产物受多因素的调节,为避免干扰,胃癌患者入选前未经任何抗肿瘤治疗。排除标准:(1)本身具有代谢性疾病,如糖尿病、痛风、高脂血症等;(2)血液疾病;(3)怀孕或哺乳期女性;(4)过去2周曾发生重大的应激反应,如烧伤或者精神创伤等;(5)过去两周服用特殊药物如抗生素、激素、非甾体类抗炎药;过去2周有任何急性疾病症状;(6)采血前采取过任何医疗措施。早期胃癌根据2010年国际抗癌联盟美国癌症联合委员会(UICCAJCC)TNM分期标准(第7版)。实验组均为TNMⅠA期。实验组胃镜诊断标准:早期胃癌无论有无淋巴结转移,早期病变局限于黏膜及黏膜下层,常见于胃窦部、胃体部及小弯侧。按具体形态分型可分Ⅰ型隆起型(息肉型)、Ⅱ型浅表型(胃炎型)和Ⅲ型凹陷型(溃疡型)三型。Ⅰ型主要表现为黏膜局部突起,突向胃腔,一般表面较粗糙带蒂,有的呈乳头状或结节状,表面常伴有糜烂。Ⅱ型浅表型边界常不整齐,边界不清,局部黏膜稍显粗糙,略隆起或凹陷,表面颜色常变淡或发红,可伴糜烂。Ⅲ型常见有较明显的溃疡,多超过黏膜层。实验组病理诊断标准为早期胃癌:癌组织局限于黏膜及黏膜下层。
12仪器与试剂
高效液相色谱质谱仪:Agile
t1200(G6410A),美国Agile
t公司;超纯水系统:MilliQ,美国Millipor公司;自动液体进样器:美国Agile
t公司Agile
;甲醇、乙腈、甲酸、异丙醇,美国Sigma公司。
13样本采集
采集入选人员空腹血标本3ml于含有肝素钠的采血管中静止1h凝固分层,离心(3000rpm10mi
),取上清液分装至离心管,保存于80℃冰箱待用。
14样本预处理
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将低温保存的血清样本放置室温解冻混匀,取100μL血清放入离心管,加入300μL乙腈摇晃混匀15s,室温静置15mi
,后在4℃,10000rpm离心10mi
,取上清液200μL,在常温下干燥60~90mi
,再取上清液用50μL乙腈水溶剂(3∶1)复溶,取上清液过022μm水相膜,然后上清液加入100μL内标(L2氯苯丙氨酸有独立的色谱峰,不会干扰正常样本检测,常被用来作为内标)后与超纯水室温放置1h后上样分析。
15质控(qualityco
trol,QC)
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