链DNA分子。λ噬菌体是最早使用的克隆载体之一,常用于构建基因组文库和cDNA文库。3动物病毒:质粒和噬菌体载体只能在细菌中繁殖,不能满足真核DNA重组需要。感染动物的病毒可改造用作动物细胞的载体,一般制作成穿梭载体(细菌中繁殖和克隆,然后引入真核细胞)。目前常用的载体改造自SV40、逆转录病毒和昆虫杆状病毒。几种重要的病毒基因组?1.乙肝病毒:HepatitisBVirus,HBV基因组是一环状的部分DNA双螺旋结构,长约32kb,其中约三分之二为双螺旋。长链为负链(与病毒mRNA互补),短链为正链,短链长度视病毒而异。短链之间空隙由病毒颗粒中的DNA聚合酶充填。2.逆转录病毒:retrovirus,病毒颗粒内基因组由两条相同的单股正义RNA组成,故反转录病毒为双倍体;逆转录病毒RNA5’端有帽子结构,3’有polyA尾;基因组RNA的一部分与一个特异的宿主tRNA成碱基配对,此tRNA起始DNA合成。
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1根据病毒宿主分类,分为植物病毒,动物病毒,细菌病毒2乳头瘤病毒基因组为闭环双链DNA,腺病毒基因组为线性双链DNA噬菌体∮X174和M13基因组为单链环状DNA,脊髓灰质炎病毒基因组为单链RNA呼肠孤病毒基因组为双链RNA
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f3不连续基因组流感病毒8条单链RNA组成,呼肠孤病毒由10条双链RNA组成4基因重叠同一段DNA编码2或3中蛋白质分子,仅见于线粒体和质粒DNA中5噬菌体∮X174感染大肠杆菌合成10种蛋白质,总分子量250KDa,相当于6078个核苷酸容纳的信息,所以噬菌体∮X174有10个基因重叠6除了噬菌体∮X174,基因重叠还出现在HPVSV40HBVG4噬菌体中7噬菌体∮X174不编码DNA序列是基因表达调控区,在H和A之间67个碱基,包括RNA聚合酶结合位点,转录终止信号及核糖体结合位点8腺病毒晚期表达基因在晚期启动子转录控制下转录出29000
t,最终形成18种mRNA,其中12种编码病毒的各种外壳蛋白9M13噬菌体含6400
t,90以上编码蛋白质,包含10个基因,用于双脱氧链终止法DNA测序,制备仅有一条链得到放射性标记的DNA探针,利用核苷酸进行定点突变中作为模板,10λ噬菌体DNA两条链5端均有长约12
t的互补单链,基因组包括50个基因,一部分为可置换部位,用于插入外源基因。左臂部分包含编码头尾部蛋白的基因,右臂部分包含与DNA复制相关基因11HBV中ORF有4个,编码核壳蛋白,包膜蛋白,病毒复制酶以及与病毒基因表达相关蛋白。12HBV中短链顺向重复序列DR1和U5位于前C开放阅读框架中,是合成长链的起始部位,DR2位于聚合酶基因和Xr