肿瘤细胞的敏感性约1×10－6左右，比Souther
印迹杂交法约提高10000倍。应用PCR技术检测CTC受到缺乏肿瘤特异性和高表达标记的限制，该方法敏感度高，易出现假阳性，同时由于癌细胞的异质性亦可出现假阴性。目前多应用突变等位基因扩增（muta
talleliespecificamplificatio
MASA）的PCR技术，检测大肠癌和胰腺癌患者外周血中具有Kras癌基因突变的肿瘤细胞。
23逆转录聚合酶链反应（RTPCR）
f这种方法在PCR的基础上扩增由肿瘤特异性mRNA序列逆转录的DNA片断。RNA检测的特异性靶mRNA有：①某些基因改变后RNA水平的异常，如点突变（p53、ras）、缺失（BRCA1、BRCA2）、异构（CD44）、扩增（erbB2、EGFR）；②组织特异性标志mRNA如muci
、cytokerati
、ER、maspi
；③肿瘤特异性标志mRNA，如CEA、βHCG等。1991年Smith等3首先将RTPCR应用于外周血黑色素瘤细胞的检测。此后，这一技术已分别在多种恶性实体瘤中得以应用，如对消化系统肿瘤作CEAmRNA检测，对乳腺癌作MAMmRNA检测，对肝癌作AFPmRNA检测，对前列腺癌作PSAmRNA检测等。RTPCR方法具有高度的敏感性和特异性，其敏感性可达10－610－7，特异性在于其扩增模板为mRNA：RNA在细胞外环境中极不稳定，一旦检测到特异性mRNA的表达就意味着有肿瘤细胞的存在；mRNA的表达不受相应编码蛋白表达高低的影响；引物的设计可以跨越两个不同的外显子，避免了整个基因组的扩增，有利于消除假阳性结果。由于RNA易被RNA酶降解，同时该方法具有PCR技术的局限性，仍可出现假阳性和假阴性结果。为提高RTPCR的特异性和敏感性，新的方法不断产生，在RTPCR的基础上又增加了定量逆转录多聚酶链反应（QPCR）荧光定量逆转录多聚酶链反应（FQPCR）等。
24流式细胞术（flowcytometryFCM）
该技术是以流式细胞仪为工具对悬液中的细胞进行测量分析，具有快速、准确的优点，其筛选细胞的速度为103104个细胞s。应用FCM从血液中检测上皮性肿瘤细胞其价值很大程度上依赖于可分析的细胞数量4。尽管FCM不能提供有关细胞形态方面的信息，但是其在鉴定、计数肿瘤细胞方面比RTPCR更可靠。Ire
e等研究证明FCM可作为一种检测CTC数量的有力工具。现有的FCM需取大约50ml外周血方可检测肿瘤细胞负荷，若检测前进行特异性富集肿瘤细胞，将在很大程度上提高检测的敏感性。
25其它
目前，CTC检测方法较多，但检出率仍有限，一些明确存在转移灶的患者CTC阳性率可能很低。导致这一情况的原因可能是不了解肿瘤细胞释放的规律（CTC的释放可能是间歇性的），且循环中的肿瘤细胞常常r