人补体C1抑制剂ELISA试剂盒使用方法
检测范围：10μgL400μgL使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中补体C1抑制剂（C1INH含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人补体C1抑制剂（C1INH水平。用纯化的人补体C1抑制剂（C1INH抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入补体C1抑制剂（C1INH，再与HRP标记的人补体C1抑制剂C1INH抗体结合，形成抗体抗原酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的补体C1抑制剂C1INH呈正相关。用酶标仪在450
m波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人补体C1抑制剂C1INH浓度。试剂盒组成12345630倍浓缩洗涤液酶标试剂酶标包被板样品稀释液显色剂A液显色剂B液20ml×1瓶6ml×1瓶12孔×8条6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1瓶789101112终止液标准品（800μgL）标准品稀释液说明书封板膜密封袋6ml×1瓶05ml×1瓶15ml×1瓶1份2张1个
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标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。400μgL200μgL100μgL50μgL25μgL5号标准品4号标准品3号标准品2号标准品1号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
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加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
f重复5次，拍干。6加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7温育：操作同3。8洗涤：操作同5。9显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻r