实验一细胞膜透性改变的测定(植物组织逆境伤害程度的测定)
电导仪法
一实验要求
1学会使用电导仪法测量细胞膜透性改变。2加深理解重金属汞离子胁迫下水生植物细胞膜结构的改变对膜透性的影响。
二实验原理
植物组织受到逆境伤害时,由于膜的功能受损或结构破坏,而使其透性增大,细胞内各种水溶性物质包括电解质将有不同程度的外渗,将植物组织浸入无离子水中,水的电导将因电解质的外渗而加大,伤害愈重,外渗愈多,电导度的增加也愈大。故可用电导仪测定外液的电导度增加值而得知伤害程度。
三实验材料、试剂与仪器设备
(一)实验材料水鳖叶片
(二)试剂NaCl溶液
(三)仪器设备电导仪,天平,抽气机,恒温水浴锅,剪刀,镊子。
四实验步骤
1制作标准曲线如需定量测定透性变化,可用纯NaCl配成0、10、20、40、60、80、100μgmL的标准液,在20~25℃恒温下用电导仪测定,可读出电导率。以电导率为纵坐标,NaCl量为横坐标做标准曲线。
2选取水鳖叶片在一定部位上生长叶龄相似的叶子若干,剪下后,先用纱布拭净,称重05g。
3在50ml小烧杯中剪成长约025cm2小片,并用玻棒或干净尼龙网压住,在杯中
f准确加入蒸馏水20mL,浸没叶片。4放入真空干燥器,用抽气机抽气7~8mi
以抽出细胞间隙中的空气。重新缓缓
放入空气,水即被压入组织中而使叶下沉。5将抽过气的小烧杯取出,放在实验桌上静置20mi
,然后用玻棒轻轻搅动叶片,
在20~25℃恒温下,用电导仪测定溶液电导率。6测过电导率之后,再放入100℃沸水浴中15mi
,以杀死植物组织,取出放入自
来水冷却10mi
,在20~25℃恒温下测其煮沸电导率。
五结果记录与计算
数据记录:
NaCl的标准曲线
K1NaCl浓度ugml
a0020
电导值uscm
温度℃
0
237
254
10
206
253
20
465
254
40
846
253
60
1236
256
80
162
254
100
207
254
电导值uscm250
电导仪法测NaCl的标准曲线
200
150
电导仪法测细胞
100
膜透性的改变
50
001020406080100NaCl的浓度ugml
fK1Hg浓度ugml
电导值3002502001501005000
a0020电导值uscm
温度
0
832
257
5
230
259
10
258
258
20
210
252
40
777
252
电导仪测量水鳖的电导曲线
电导仪测量水鳖的电导曲线
5102040Hg浓度
数据计算1按下式计算相对电导度:S1相对电导度(L)S2相对电导度的大小表示细胞膜受伤害的程度。
L5230832276L10258832310
L20210832252L40777832093
f相对电导度
相对电导度
35
3
25
2
15
1
05
0
1
2
3
4
Hg浓度ugml
2由于室温对照也有r