点样时应注意血清要适量，应形成均匀的直线，并避免弄破薄膜（图32）。
8cm＋－点样线2cm
图32
电泳点样位置示意图
15cm
3平衡与电泳将点样后的薄膜有光面朝上，点样的一端靠近负极，平直地贴于电泳槽支架的滤纸上，平衡约5分钟。盖上电泳槽盖，通电进行电泳。调节电压为100～160伏，电流04～06mA／cm宽，夏季通电45分钟，冬季通电60分钟，待电泳区带展开25～35cm时断电。4染色
f用无齿镊小心取出薄膜，浸于染色液中1～3分钟（以清蛋白带染透为止）。染色过程中应轻轻晃动染色皿，使薄膜与染色液充分接触，薄膜量较多时，应避免彼此紧贴而影响染色效果。5漂洗准备3个培养皿，装入漂洗液。从染色液中取出薄膜，依次在漂洗液中连续浸洗数次，直至背景无色为止。将漂净的薄膜用滤纸吸干，从正极端起依次为清蛋白（A）、α1、α2、β及γ球蛋白（图33）。
6定量1洗脱法：取6支试管，编号，分别为A、α1、α2、β、γ和空白管。于清蛋白管加入04molLNaOH溶液4ml其余5管加2ml。剪下各条蛋白区带，另于空白部分剪一条与各蛋白区带宽度近似的薄膜作为空白，分别浸入各管中，振摇数次，置37℃水浴20分钟，使色泽完全浸出。用620
m波长以空白管调零比色，读取各管吸光度，按下式计算：TA×2α
1
α2βγ
清蛋白＝清蛋白管吸光度×2T×100α1球蛋白＝α1球蛋白管吸光度T×100α2球蛋白＝α2球蛋白管吸光度T×100β球蛋白＝β球蛋白管吸光度T×100γ球蛋白＝γ清蛋白管吸光度T×1002扫描法：待染色的醋酸纤维素薄膜完全干燥，置透明液中约3分钟，取出贴于玻片上，薄膜完全透明。将已透明的薄膜放入全自动光密度计中，对蛋白区带进行扫描，自动绘出电泳图，并直接打印出各区带的百分含量。【注意事项】1标本不能溶血，否则，β球蛋白浓度偏高。2．每次电泳时应交换电极，以使两侧电泳槽内缓冲液的正负离子相互交换，使缓冲
f液的pH维持在一定水平。3．电泳槽缓冲液的液面要保持一定高度，过低可能出现了球蛋白的电渗现象向阴极移动。同时，电泳槽两侧的液面应保持在同一水平面，否则，通过薄膜时有虹吸现象，将会影响蛋白质分子的泳动速度。4．电泳时电泳槽要密闭，以保持湿度，否则，薄膜水分蒸发干燥，使电流下降，分离不佳。5．电泳失败或图谱不理想的常见原因。1电泳图谱不整齐：①点样不均匀；②薄膜未完全浸透或温度过高致使膜面局部干燥或水分补给不足；③缓冲液变质；④电泳时薄膜放置不正，与r