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最陡,几乎呈直线,补体量的少许变动,也会造成溶血程度的较大改变,即曲线此阶段对补体量的变化非常敏感。因此,实验常以50溶血作为终点指标,它比100溶血更为敏感,这一方法称为补体50溶血实验(50compleme
themolysis),即CH50。(二)CH50测定方法在正式试验之前,应调制红细胞浓度、滴定溶血素效价。1红细胞浓度的调整2溶血素滴定3稀释缓冲液磷酸缓冲液或巴比妥缓冲液等均可用于溶血试验。450溶血标准管做CH50试验时,应同时配制50溶血标准管。550溶血总补体值的计算(三)方法评价与临床意义CH50测定补体活性,方法简便、快速,虽敏感性较低,但可以满足对血清补体含量测定的要求。该法主要检测的是补体经典途径的溶血活性,所得结果反映补体C1~C9等9种成分的综合水平。严重肝病或营养不良时,由于蛋白合成障碍,可不同程度地引起血清补体水平的下降。在细菌感染,特别是革兰阴性细菌感染时,常因补体旁路途径的活化而引起血清补体水平的过度降低。心肌梗死、甲状腺炎、大叶性肺炎、糖尿病、妊娠等情况下,血清补体水平常见升高。补体检测常可用于自身免疫病的诊断,也可作为某些疾病活动期的参考指标。第三节单个补体成分的测定
在30多种补体成分中,C3、C4、C1q、B因子和C1酯酶抑制物等,常被作为单个补体成分的检测指标。测定方法为免疫溶血法和基于抗原抗体反应的血清学法(免疫化学法),前者用来检测单个补体成分的活性,后者可测定其含量。目前应用自动化免疫散射比浊法可准确测定体液中C3、C4等多个单一的补体成分。一、免疫溶血法溶血法主要根据抗原与其特异性抗体(IgG、IgM型)结合后可激活补体的经典途径,导致细胞溶解。该方法中抗原为SRBC,抗体为兔或马抗SRBC的抗体,即溶血素,将两者组合作为指示系统参与反应。试验中有两组补体参与,一组是作为实验反应系统的补体,选用或制备缺少待测成分的试剂(R试剂),此类试剂可选用先天缺乏某单一补体成分的动物或人血清。另一组为待测血清中的补体,当加入待测血清,使原来缺乏的成分得到补偿,补体成分齐全,级联反应恢复,产生溶血。采用免疫溶血法检测待测标本中某一单个补体成分是否缺乏,可以帮助诊断补体某个成分缺失或其含量正常但无溶血活性的先天性补体缺陷。该法不是检测某补体成分的具体含量,而是检测其活性,在某些需了解该成分活性情况下,本试验适用。
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f二、免疫化学法免疫化学法,分为单向免疫扩散、火箭免疫电泳、透射r
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