2012年全国高考生物试题分类汇编（新课标版）选修三《现代生物技术》基因工程（2012全国卷新课标版）40．现代生物科技专题（15分）根据基因工程的有
关知识，回答下列问题：（１）限制性内切酶切割ＤＮＡ分子后产生的片段，其末端类型有（２）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：和。
为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是（３）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即接酶和录产物，常采用DNA连接酶。，产物是和。若要在体外获得大量反转也可作为运载体。。技术。（４）反转录作用的模板是（５）基因工程中除质粒外，体细胞，原因是。DNA连
（６）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受【解析】本题着重考查基因工程方面的知识。限制性核酸内切酶可以将DNA分子切成两种类型的末端，平末端和黏性末端。两种不同酶切割之后便于相连，所产生的黏性末端必须相同。ＥcoliDNA连接酶可以连接黏性末端，Ｔ４DNA连接酶可以连接两种末端，反转录是以mRNA为模板逆转录先合成单链DNA，再合成双链DNA，利用ＰＣＲ技术进行大量扩增。基因工程中可以选用质粒，噬菌体、动植物病毒做载体。当受体细胞是细菌时，为了增大导入的成功率，常用Ca处理，得到感受态细胞，此时细胞壁和细胞膜的通透性增大，容易吸收重组质粒。【答案】（１）平末端和粘性末端的相同应）（３）Ｔ４Ｅcoli（５）动植物病毒（２）切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生ＰＣＲ（聚合酶链式反（６）未处理的大肠杆菌吸收质粒（外（４）mRNA单链ＤＮＡ
λ噬菌体的衍生物
源DNA）的能力极弱
（2012福建卷）32．现代生物科技专题
肺细胞中的let7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let7基因导入肺癌细胞实验表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图１。
f请回答：（１）进行过程①时，需用酶切开载体以插入let7基因。载体应用RNA聚合。
酶识别和结合的部位，以驱动let7基因转录，该部位称为（２）进行过程②时，需用
酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。
（３）研究发现，let7基因能影响RAS的表达，其影响机理如图２。据图分析，可从细胞提取可能是由于细胞中【答案】（10分）（1）限制性核酸内切酶（或限制）（2）胰蛋白（3）RNA【解析】（1r