基英肽体对肿瘤细胞DNA、RNA和蛋白质合成的抑制作用
摘要:本文应用放射性同位素前体参入法研究基英肽对人慢性髓性白血病细胞株K562人早幼粒白血病细胞株HL-60,鼠×鼠杂交瘤细胞株E4B11C9和小鼠黑色素瘤细胞B16F10的DNA、RNA和蛋白质合成作用的影响。结果表明:10-5000μgml1的基英肽体外对四株肿瘤细胞的DNARNA的蛋白质合成均有不同程度的抑制作用,并存在明显的剂量依赖性和瘤株差异性。在大剂量时以对RNA的抑制作用最强。本实验为基英肽的抗肿瘤作用机制研究及临床应用提供了有益的实验依据。
关键词:基英肽;生物反应调节剂;抗肿瘤作用;同位素前体参入。基英肽(Polyacti
APAA)是我国研制的具有多种生物活性的生物反应调节剂。目前广泛应用于急慢性白血病、肺癌、食道癌等多种肿瘤的临床治疗,可提高近期疗效。本文应用同位素参入法对K562、HL-60、E4B11C9、B16F10四株肿瘤细胞的DNA、RNA和蛋白质合成作用进行研究,旨在进一步探讨PAA的抗肿瘤作用机制。【材料和方法】1、瘤株:人慢性髓性白血病细胞株(huma
chro
icmyeloge
ousleukemiacellli
eK562)重庆医科大学病理教研室国外引进提供。人早幼粒白血病细胞株(huma
promyelocyticleukemiacell
li
eHL60),中国医学科学院药物研究所提供。抗钩体017株外膜鼠×鼠杂交瘤细胞株E4B11C9,本校钩端螺旋体病研究室提供。
fB16F10黑色素瘤:G57BL6J小鼠体内诱导的具有高度肺转移的细胞亚株,四川抗菌素工业研究所提供。2、药品与试剂:基英肽粉剂(8776-77)。RPMI1640日本Nissui制药株式会社产品,配制成含10%小牛血清,20
molHepes青霉素100uml1链霉素100μgml11谷氨酰胺,5×10-5mol二基乙醇的RPMI1640液,用5%NaHCO3调整到PH为70-72备用。Hepes英国Merck公司产品。NBCS新生小牛血清:成都华西生化制品厂产品,于56℃水浴中灭活30分钟,4℃冰箱保存备用。3HTDR(比工为103TBqmmol1)3HUR比度为0796TBqmmol13HLe
比度为24TBqmmol1,均为中国科学院上海原子能研究所的产品。3、靶细胞悬液制备:K562细胞、HL60细胞体外培养呈悬浮生长,E4B11C9呈贴壁生长。取传代24小时的肿瘤细胞(细胞活力95%),用RPMI1640液调配K562、HL60、E4B11C9细胞悬液浓度分别为5×104ml-1、1×105ml1。B16F10黑色素瘤细胞的制备,无菌条件下取出瘤组织,制备单细胞悬液,浓度为5106ml-1,细胞活力为95%。4、3HTdR,3HUR和3HLe
参入测定:Kikuchi方法略加改进,于96孔培养板中加入上述调配好浓度的靶细胞悬液各100实验r