“前体细胞”性质的进一步认识，为成体干细胞的研究增添了新的内容，并使牙齿组织工程研究有了突破性的进展。2人乳牙牙髓基质干细胞的取材、分离、培养及鉴定方法人乳牙牙髓基质干细胞的取材虽简单却局限，有学者报道［5］，将脱落的乳牙置牛奶瓶中冷冻过夜，从冠和根取出牙髓组织。也有学者从临床上拔出的松动的乳牙的牙髓中获取牙髓组织，但是由于此时牙根已吸收，因此获取的大多是冠髓。2004年刘少华等对人根髓、冠髓细胞进行培养，发现培养
f的根髓细胞比冠髓细胞具有较高的成功率和贴壁率，较强的细胞活性，在形态上根髓细胞比冠髓细胞更具原始性，功能上根髓比冠髓更易诱导矿化，由此推测牙髓干细胞可能存在于全部牙髓中，但在根髓中的密度要比冠髓中高。目前，人乳牙牙髓干细胞的分离培养方法主要有贴壁法、酶消化法、限稀释法、梯度离心法和免疫选择法。关于人乳牙牙髓基质干细胞的鉴定方法，最有效的是利用细胞表面的相对特异性分子标记，从而对其进行识别、分离和纯化，但目前对人乳牙牙髓干细胞的特异性标记尚未清楚，因此对其鉴定面临着巨大的困难。3牙髓基质干细胞的生物学特性牙髓基质干细胞存在着分化层次［7］即牙髓干细胞群中包含着增生能力不同的细胞亚群，其中部分趋向于易分化，部分趋向于自我更新。因此，牙髓基质干细胞具备多向分化的潜能和自我更新的生物学特性。31多向分化的潜能311成牙本质细胞Couble等［8］对发育早期的牙髓进行体外培养，发现可分化形成牙本质细胞，并出现矿化结节，在实验中加入β甘油磷酸钠诱导分化后，牙髓细胞出现极化，形成突起，突起排列成一个方向，并且相互之间形成连接复合体，胞体内形成牙本质结构具有的典型细胞器，而后出现矿化，X线显微分析表明有钙、磷的沉积，电子衍射证明矿化中晶体结构的存在，从而证明牙髓基质干细胞有分化为成为细胞的潜能。林云峰等对人乳牙牙髓基质细胞（SHED）进行体外分离培养和鉴定，并比较矿化诱导前后涎磷蛋白（DSPP）表达的差异，结果显示乳牙牙髓基质细胞呈成纤维细胞样贴壁生长，经诱导培养14d后变为多角型和柱型，胞核而圆，DSPP染色阳性细胞比矿化诱导前明显增加，证明SHED具有向成牙本质细胞分化的潜能。312脂肪样细胞由于尚未证明牙髓组织中存在脂肪细胞，因此，将牙髓干细胞诱导成为具有脂肪细胞特性的细胞对牙髓干细胞的多向分化能力是一个有力的证明。Gro
thos［7］2002年以骨髓基质干细胞（BMSCs）为对照，在培养基中加入05mmolL异丁甲r