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铁皮石斛离体快繁技术
作者：余乐兰芹英姜宗庆来源：《江苏农业科学》2014年第11期
摘要：以铁皮石斛（De
drobiumoffici
aleKimuraetMigo）为研究对象，通过对不同无机盐浓度、不同培养温度以及不同激素浓度配比等影响因子进行研究，确立以种子无菌萌发为途径的铁皮石斛组培快繁体系。结果表明：25℃时，12MS2mgL6BA01mgLNAA培养基配方最有利于铁皮石斛原球茎的诱导和幼苗分化；12MS05mgLNAA培养基配方最适合铁皮石斛幼苗生根，生根率达100。
关键词：铁皮石斛；种子；离体快繁；优化培养基配方
中图分类号：S56723904文献标志码：A文章编号：10021302（2014）11026802
铁皮石斛（De
drobiumoffici
aleKimuraetMigo）为兰科（Orchidaceae）石斛属（De
drobium）多年生附生型草本植物，别称黑节草、铁皮兰，是我国特有的名贵药材13。此外，铁皮石斛亦有“救命仙草”“寸金草”之称4，《道臧》将其誉为“中华九大仙草之首”。近年来，由于人们对石斛生存环境的过度破坏，野生石斛长期处于被滥采滥挖的状态；加上石斛自然繁殖困难，种子萌发率低，而传统繁殖又较为缓慢，现在已经很难发现野生铁皮石斛的踪迹510，因而药用石斛市场供需矛盾也就日益凸显出来1112。本研究以铁皮石斛成熟种子为外植体，通过对不同无机盐浓度、不同培养温度以及不同激素浓度配比等问题的探讨，以期建立铁皮石斛离体快繁技术体系，从而为铁皮石斛工厂化生产提供理论依据与技术指导，对野生石斛的种质资源保护也具有重要意义。
1材料与方法
11试验材料
试验用铁皮石斛成熟种子由泰州森禾花卉园艺有限公司花木基地提供。
12试验方法
121种子无菌萌发（1）培养基种类对种子萌发的影响试验：设KC、12MS、14MS、MS等4种培养基，均添加2蔗糖、06琼脂、20马铃薯汁，调节pH值为56～58，培养温度为25℃，光照度2000lx，光照时间12hd，环境湿度60～70。（2）培养温度对种子萌发的影响试验：设15～30℃和2530℃变温处理，培养基配方为12MS2蔗糖06琼脂20马铃薯汁，pH值56～58，培养温度为（25±1）℃，光照度为2000lx，光照时间为
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12hd，环境湿度60～70。12瓶为1组，每组3个重复，30d为1个周期，观察并统计种子萌发、原球茎的生长情况，选出最适宜铁皮石斛种子无菌萌发的基础培养基。
122原球茎增殖与分化研究不同激素浓度配比对铁皮石斛原球茎增殖与分化的影响，培养基配方为：MS1～3mgL6BA01～05mgLNAA2蔗糖06琼脂20马铃薯汁。调节pH值至56r