培养基的配制
植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基。MS培养基的配制包括以下步骤。培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。这样每次使用时，取其总量的12050mL或12005mL，加水稀释，制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。大量元素母液Ⅰ大量元素母液Ⅰ母液NH4NO3KNO3CaCl22H2OMgSO47H2OKH2PO4微量元素母液Ⅱ微量元素母液Ⅱ母液KIH3BO3M
SO44H2OZ
SO47H2ONa2MoO42H2OCuSO45H2OCoCl26H2O铁盐母液Ⅲ铁盐母液Ⅲ母液FeSO47H2ONa2EDTA2H2O有机成分母液Ⅳ有机成分母液Ⅳ母液ⅣA肌醇200005560746055166124044601720503300038000880074003400mg／L
fⅣB烟酸100100100
盐酸吡哆醇维生素B6盐酸硫胺素维生素B1甘氨酸400
以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为200倍浓缩液。上述几种母液都要单独配成1L的贮备液。其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1L。母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO47H2O和Na2EDTA2H2O分别放到450mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至55，最后定容到1L，保存在棕色玻璃瓶中。各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。MS培养基中还需要加入2，4二氯苯氧乙酸2，4D、萘乙酸NAA、6苄基嘌呤6BA等植物生长调节物质，并且分别配成母液01mgmL。其配制方法是：分别称取这3种物质各10mg，将2，4D和NAA用少量1mL无水乙醇预溶，将6BA用少量1mL的物质的量浓度为01molL的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100mL，即得质量浓度为01mgmL的母液。配制培养液用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的用量：母液Ⅰ为50mL，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5mL。再取2，4D5mL、NAA1mL，与各种母液一起放入烧杯中。配制培养液时应注意：①在使用提前配制的母液时，应在量取各种母液之前，轻轻摇动盛放母液的瓶子，如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染，应立即淘汰这种母液，重新进行配制；②用量筒或移液管量取培养基母液之前，必须用所量取的母液将量筒或移r